查看完整版本请点击这里：
【求助】冻存的细胞提RNA
各位大大，本人前段时间-80 冻的细胞，现在想提RNA， 但-80拿出来后直接马上加Trizol 裂解不了啊，吹打近20min才稍微有溶解，就是一团。后面加异丙醇离心后也不见RNA沉淀，比较急啊，求大大们处理过类似的情况么？ 是否应该拿出冰箱后用小的研杵研磨散呢？ 谢谢指教！【求助】冻存的细胞提RNA
查看完整版本请点击这里：
【求助】冻存的细胞提RNA
【求助】冻存的细胞提RNA
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2015-4-06 17:29 作者: 嗅嗅 来源: 分析测试百科网
最新回复
JK.jon (2015-4-06 17:31:04)
就漩涡振荡一下，浑浊就好。
提RNA其他细节操作也要注意。
DCS (2015-4-06 17:31:24)
为什么不先经过复苏程序以后再提呢？
newway (2015-4-06 17:31:52)
S6044 (2015-4-06 17:32:46)
luoliqiong (2015-4-06 17:33:04)
嗅嗅 (2015-4-06 17:33:30)
==================================================
但我没用保护剂什么的，直接冻在超低温冰箱-80的，怎么弄呢
zzzz (2015-4-06 17:33:55)
===========================================================
我觉得如果你冻存的细胞比较多，可以尝试一下进行复苏，说不定可以。
zzzz (2015-4-06 17:34:13)
===============================================================================================================
如果你直接提取，最终没有得到RNA可能有两个方面原因：一个是TRIZOL裂解的细胞量太少，还有大部分还冻着根本没有进入裂解液中；另外一个就是你裂解的过程中RNA有降解。关键就是你在用TRIzol解冻细胞的时间，这个过程不能太长而且必须保证TRIzol充分裂解细胞。研磨也是一种方法，不过凡是要接触样品的东西，都要经过DEPC处理，包括研钵和研杵。
【求助】冻存的细胞提RNA