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椰子死亡类病毒的检验方法

2022.5.25

电泳检测

应用双向电泳法可有效地检测此种类病毒。第一向电泳是利用分子量的不同将类病毒与寄主核酸分开,第二向电泳是在变性条件下把类病毒的环状和线状分子分开(环状分子比线状分子跑得慢),从而确定有无类病毒。银染色技术的应用,将电泳检测灵敏度提高到放射性同位素标记方法的水平。

分子杂交

一类是RNA探针,即利用纯化的类病毒作RNA未端标记,进行RNA-PNA杂交,这种方法在很短时间内就能制备出探针,但制备量少,一般不用此法。另一类是cDNA探针,这是将椰子死亡类病毒RNA先逆转录成与之互补的DNA(cDNA),然后再标记成为cDNA探针,只需少量RNA就能制备出大量探针。现在一般用此方法,探针的标记可以用同位素,也可以用非同位素,只要在样品中含有与探针互补的核酸则呈阳性检测结果。

PCR是目前用于类病毒检测更为理想的方法。

生物测定

人工接种的椰子幼苗,在心叶以下至少有3处嫩叶出斑点,同时植株生长变慢,叶子变小,新生叶减少,到预定的结果期不结果。槟榔(Arecacatechu)、高行李叶椰子(Corypha elata)、马尾拉棕榈(Adonidia merrilli)、油棕、散尾葵(Chrysalidocarpus lutescens)和王棕榈(Oreo-doxa regia)等,人工接种后,其嫩叶褪绿或出现桔红色斑点,由于潜育期太长(2~4年)很少有人用此方法。

有关检疫规定

椰子死亡类病毒是中国公布的《中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录》中规定的二类危险性病毒,应严格限制从疫区引进椰子种苗。必须引进的种苗,需由输出国出具检疫证书,引进后在隔离检疫圃试种2年以上。


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