【转帖】【讨论】细胞冻存管理

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与细菌相比,细胞更加脆弱,所以细胞的冻存、复苏及管理需要更加小心和严谨。
对于细胞的液氮冻存管理是一个不容忽视的问题,记得读研究生时,实验室的液氮管理混乱,学生经常找不到自己的细胞,或者即使找到了也不容易复苏成功。
如今自己负责实验室管理,对于细胞冻存也采取了一些方案(制定了制度和细胞冻存记录表),刚开始的时候,细胞种类和数量较少,比较好管理。但是随着实验室的发展,冻存的细胞种类和数量越来越多,而且不断有新的细胞放入和细胞复苏。所以现在逐渐开始发现,细胞不太容易被找到,而且冻存细胞前也要先看看液氮罐哪里有空位,这样的次数多了对细胞的影响很大。
对于细胞冻存管理请大家踊跃发言,提出你们的宝贵意见。
下图是我制定的细胞冻存和复苏登记表,供大家参考,并请各位提出改进意见。谢谢
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  • kulee (2014-8-01 17:31:44)


    置顶支持!
    “但是随着实验室的发展,冻存的细胞种类和数量越来越多,而且不断有新的细胞放入和细胞复苏。所以现在逐渐开始发现,细胞不太容易被找到,而且冻存细胞前也要先看看液氮罐哪里有空位,这样的次数多了对细胞的影响很大。”
    很多实验室都会遇到这样的问题,值得大家交流经验~
    细胞登记还需要有细胞来源(ATCC;XX细胞库;XX实验室等)
  • mercedes (2014-8-01 17:32:38)


    相关疾病:
    头痛
    把每个冻存架标上号,每个架子上的冻存盒自下而上依次编号(即使不写明,也要默认自上往上第几盒),在记录本上明确记录各人的冻存架号,每个冻存架上所冻细胞的种类,冻存管数。每次有人复苏细胞,需要登记复苏细胞名称,管数,如此,每次打开液氮罐之前先搞清细胞放在何处,打开后直接取用即可。我们一般这样操作,目前还没出现什么问题。
    如果实验室人多,且冻存盒数少,那只好多人分一个冻存架,但务必标明冻存盒归属,这样在一两分钟内取出细胞,不会影响大局。
    我们这里冻存细胞存在的问题:即使冻存管口多层封闭,液氮仍有可能会跑进部分冻存管,只要有液氮进入,细胞复苏时即使不炸管,也是有百分之六七十的污染率,这一直是我比较头痛的问题,因此,最近在考虑,如果可以,想买个深低温冰箱(-150度)用于冻存细胞和组织。
  • qqshepherd (2014-8-01 17:33:12)


    外加 每一批次的冻存数量;经手人;冻存管、冻存液、培养基、血清等厂家,批号;冻存后24h内复苏情况;
    以及之后每一次的复苏情况(状态、贴壁时间、有无发现污染等)
  • 龙小好汉 (2014-8-01 17:33:56)


    请大家分享一下你们的细胞冻存和复苏登记本格式!
  • 水母 (2014-8-01 17:34:22)

    有条件的实验室可以考虑一下冻存管理系统,就是将信息输入到计算机,再自动打印生成一个条形码,贴在冻存管外面,这样样品的位置和信息就非常方便查询,复苏的时候用条码枪扫描一下就可以了。
  • gemei0115 (2014-8-01 17:35:04)

    相关疾病:
    头痛
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    把每个冻存架标上号,每个架子上的冻存盒自下而上依次编号(即使不写明,也要默认自上往上第几盒),在记录本上明确记录各人的冻存架号,每个冻存架上所冻细胞的种类,冻存管数。每次有人复苏细胞,需要登记复苏细胞名称,管数,如此,每次打开液氮罐之前先搞清细胞放在何处,打开后直接取用即可。我们一般这样操作,目前还没出现什么问题。
    如果实验室人多,且冻存盒数少,那只好多人分一个冻存架,但务必标明冻存盒归属,这样在一两分钟内取出细胞,不会影响大局。
    我们这里冻存细胞存在的问题:即使冻存管口多层封闭,液氮仍有可能会跑进部分冻存管,只要有液氮进入,细胞复苏时即使不炸管,也是有百分之六七十的污染率,这一直是我比较头痛的问题,因此,最近在考虑,如果可以,想买个深低温冰箱(-150度)用于冻存细胞和组织。
    ......
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    用质量好的冻存管,冻存前拧紧,在程序降温盒内-80度过夜,然后再放入液氮这样可能会解决进液氮的问题,我们这边倒是很少有进液氮这种事
  • seagate (2014-8-01 17:36:12)

    最好手写板和电子版两套管理,手写版准确不易造假可作为原始记录资料保存,电子版便于管理使用。就是麻烦点
  • 尘朵朵 (2014-8-01 17:36:41)


    我们实验室也刚刚开始进行细胞冻存的管理,虽然进程缓慢,但还是一步一步的前进着。就我们实验室情况大体说明一下,不足之处还望各位指正。
    1、登记方式:采用手写版(订装成册放在液氮灌旁边)和电子版(放在实验室的公共邮箱里)
    2、登记的内容:细胞名称(中英文)、细胞编号、细胞来源、细胞特征描述(包括细胞图片)、细胞使用培养基以及冻存人、冻存支数、冻存时间和位置。
    3、另外由于本实验室使用的冻存盒是抽屉式样的,所以针对相应的冻存盒做了电子版的示意图,并在毎一格子中做好细胞位置的登记。
  • 雎鸠05 (2014-8-01 17:37:35)


    提一个建议,不要根据细胞来建立档案,要根据你的冻存位置来
    企业的方法是,根据冻存的位置,来登记管号,不要根据你的细胞株来确定。
    1.给液氮罐加锁,专人管理,每次开锁都有记录,谁在谁开的锁,取出来哪一只细胞
    2 边上放个登记本,根据每个冻存架所保存的细胞种类来登记
    3 关于进液氮污染的问题,用医用橡皮胶布围绕管子口缠一圈,上面还可以写上冻存细胞名称和批号。
  • lorri (2014-8-01 17:38:03)


    冻存管封上封口膜就可以防止液氮进入了,
    另外在北京利康达胜公司有专门做液氮冻存盒地,
    很好用。查找,冻存很方便
  • 宁小胡 (2014-8-01 17:38:31)


    对于公共实验室,给液氮罐加锁,专人管理,存取均需登记,形成可追溯体系。
    液氮罐定置管理。以液氮罐为管理主体。
  • 11_hjx (2014-8-01 17:38:59)

    一定要有个经手人,保证任何人萃取细胞都要经过这个人手,而且看了一下 ,那个表里面应该加上细胞的描述,免得时间长了不知道那细胞经过什么处理过。
  • dodoit (2014-8-01 17:39:17)


    我认为冻存和复苏细胞应该有专人负责;有此人来进行管理,包括细胞的冻存和复苏工作,和做好下面工作:
    1、制定登记方式:采用手写版和电子版
    2、制定登记的内容:细胞名称(中英文)、细胞编号、细胞来源、细胞特征描述(包括细胞图片)、细胞使用培养基、冻存支数、冻存时间和位置。
    3、建立细胞库, 细胞库分为一级、二级、三级。如果要使用细胞,先用三级细胞。
    使用细胞者,先向该管理者申请,此人向你提供有关你所需细胞的一切信息,签字后方可使用。
  • yyaxw84 (2014-8-01 17:39:51)


    存细胞除了按地址存放好找之外。很多娇贵的细胞一开始不要立即放入液氮液体中存放,如果有气相液氮罐最好先保存在气相液氮中,如果没有这种液氮罐,则放在普通液氮罐的上层部分(液氮蒸汽部分)。这样保存的细胞不容易受到伤害。
    Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
  • 吉吉0120 (2014-8-01 17:40:18)

    冻存管封上封口膜就可以防止液氮进入了,
    另外在北京利康达胜公司有专门做液氮冻存盒地,
    很好用。查找,冻存很方便

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    封口膜似乎不耐超低温的,但是可以用保鲜膜切成小块的来裹住管子,这样就不会进液氮了
  • 吉吉0120 (2014-8-01 17:40:59)

    存细胞除了按地址存放好找之外。很多娇贵的细胞一开始不要立即放入液氮液体中存放,如果有气相液氮罐最好先保存在气相液氮中,如果没有这种液氮罐,则放在普通液氮罐的上层部分(液氮蒸汽部分)。这样保存的细胞不容易受到伤害。
    Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

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    胞冷冻最初的24小时一般放在程序冷冻盒放在-80度冰箱,这样对细胞损伤比较小。放在液氮上方(大约是-90度,温度差不多,但是没办法实现程序冷冻的,就算在外面包一层棉花也是开始时每分钟下降几度的,这样不利于细胞的)的话,对细胞损伤也还是比较大的。
  • uaubc (2014-8-01 17:47:48)


    我想问一下各位高手,我的细胞刚拿回来时都是好好的,就冻存了一批,等到把冻存的细胞复苏的时候,细胞状态都不是很好,传代以后死得很多,我们实验室冻在-80低温冰箱的,我的细胞冻了有四个月。
  • 969 (2014-8-01 17:48:06)


    1,细胞冻存,建立数据库,每次冻,复苏做记录,冻存时记录位置号。
    2,专人管理。
    3,冻存时,最好保证细胞状态好。
  • junhun (2014-8-01 17:48:44)


    我们实验室也有和lz差不多的记录,有规矩多了。。。
  • DDD (2014-8-01 17:49:08)

    我想问一下各位高手,我的细胞刚拿回来时都是好好的,就冻存了一批,等到把冻存的细胞复苏的时候,细胞状态都不是很好,传代以后死得很多,我们实验室冻在-80低温冰箱的,我的细胞冻了有四个月。

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    细胞不宜长时间保存在-80,温度无法确保。
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