【求助】一般用嘌呤霉素筛选稳定表达的HEC-1B...

字体: 小中大 | 打印发表于: 2015-4-06 17:35 作者: bananapeople 来源: 分析测试百科网

大家好，我最近用包装的慢病毒转染了HEC-1B细胞，要用嘌呤霉素进行筛选，请问一般要选择一个多大的浓度范围才合适？一般要筛选出稳定表达的细胞株，大概要好长的时间？先谢谢啦

kewanqi2011 (2015-4-06 17:35:48)

可以自己做一个药物筛选浓度，0-10ug/mL
langlang (2015-4-06 17:36:15)

我也在用慢病毒做转染，可是包装了2次都失败了，第二次的转染效率几乎为0，彻底崩溃了，不知道是哪儿出了问题，质粒和脂质体的混合物在室温孵育后可以放在冰上吗？
bananapeople (2015-4-06 17:36:32)

哦，不是的，你说的问题我不太清楚（不好意思）；我们是请公司包装好的，直接拿来转染就是啦，只是难得筛选稳定表达的细胞株。
了了 (2015-4-06 17:36:51)

我做过，用2ug/ml 就行了
04906 (2015-4-06 17:37:14)

嘿嘿，1ml用1到10ul都可以，看情况而定看你的细胞荧光怎么样。
mickeylin (2015-4-06 17:37:36)

每种细胞都不一样，需要自己摸浓度
xevin (2015-4-06 17:38:11)

293细胞的游人做过没呀？谢谢啦！