【求助】用EP管装标本放液氮里让自己很后悔伤心...

最新回复

• finger (2015-7-02 17:37:14)

  EP管特别是国产的是经过不住剧烈的热胀冷缩作用的，如果你想继续将样品保存在液氮中，建议你将所有的样品取出后，用锡箔纸分别将你的样品包装好后，再置入液氮中，这样就不会炸裂了。当然在锡箔纸包装之前，也可以选用材质比较好的自封袋来装好你的样品，但是这样取样品出来做实验的时候相对会更麻烦些，至于如何选择，你自己看着办啦！祝顺利！

• finger (2015-7-02 17:37:36)

  
  真为楼主感到担心！我还没有这方面的经验。但分析爆炸原因我想应该不只是ep管材质热胀冷缩的问题吧，而是馆内的液气转化太快，压力大管壁不能承受才有此威力。用冻存管也有可能出现爆炸的。EP管由于密封不严更易出现，所以封口一定要严，否则易出现爆裂。解决办法可先试验一管，提出液氮面后1小时（气态氮保存），再到-80冰箱，逐渐解冻。以上办法只是理论，未经证实，楼主可参考。也希望有经验的人帮忙想办法。good luck！

• finger (2015-7-02 17:38:22)

  
  另外，可以考虑取出后迅速打开盖子，看看情况如何。

• veiwu (2015-7-02 17:38:39)

  
  好像没有碰到过。
  我用液氮做冻融，反复好几次，都没有出现过。
  倒是有一次，把液氮倒入保存管，盖住了盖子，就一下子暴了，飞到哪里都不知道。
  你可以试试取出后，立刻打开ep管盖子。

• dior (2015-7-02 17:38:56)

  
  用那种有螺纹的盖子，直接拧紧，应该不会爆炸的！

• jude (2015-7-02 17:39:29)

  
  取这样的管可以用一点点逐渐升温地方法，比如先将管脱离液氮表面1~2分钟，再向上提管至液氮罐口1~2分钟，再迅速拿出，放入装有冰的容器中，再放-80.只要到-80没炸，也就安全了。

• dior (2015-7-02 17:39:46)

  不要说EP管了，我用的冻存管都爆了，有好几次。正确的方法是：
  1. 液氮取出标本后马上放入-20度冰箱，30分钟后取出。
  2. 注意冻存管放标本时，一定要拧紧，如果液氮进去了，即使放入-20度冰箱，拿出后也会爆的。
  3. 取出标本后最好离头远一点，我们这儿有受伤的。尤其是夏天。

• fox_79 (2015-7-02 17:40:42)

  
  谢谢大家的建议，得到大家的支持和帮助，我很感动。
  我现在都不能听“膨”的声音，会想要跳起来。
  标本是晶状体前囊膜，太小太小，管子一炸东西就飞了，编号在盖子上，也没有了，就没用了。
  我放-80度试试，回来再跟大家汇报

• dhpbj (2015-7-02 17:41:17)

  先放-80度再放液氮里，要有个过程，下次要小心了。实验的这些不起眼的细节有时后果很严重。我的做法就是，把一些程序写的很详细，做试验前再详细的回想一下，就这样往往在一些微小的细节上还会多多少少的出错，习惯慢慢培养吧，急也急不来

• zhezhe (2015-7-02 17:42:12)

  
  我们也在液氮中放置提取的标本，虽没有碰到过类似的问题，但是每次取样品都会战战兢兢的！我们很理解楼主的心情，继续努力！还有谢谢大家的建议与意见，为我们以后的试验提供了保证！

• dog002 (2015-7-02 17:43:50)

  
  终于把所有的管子都安全转移了，虽然这个帖子已经沉了，但要兑现自己的承诺，写下来，以让后来的师弟师妹们有个参考意见：
  根据楼上各位热心给出的意见，我决定还是放-80°，我还有两布袋子的标本（那种长长窄窄的自制布袋），当时由于罐口小，两个布袋子挤在一起，我用力用镊子拽住一个使劲往外拉，液氮中泡久了布变得很脆，一个布袋子被我撕断了，绑绳子的袋头被我捞出来了，所有的小管子都随剩下的袋子散了下去。
  换了个长长的洗试管的刷子，把破了的袋子捣下去，这样才顺利的把另一个布袋一下抽了出来。我们是两个人，一个人把布袋提出来，一个人就迅速打开-80°冰箱，把布袋放了进去。放的瞬间听到了布袋发出嗤嗤的声音，快快关上冰箱门，等了5分钟。时间过的好慢啊，一点动静我都很敏感，还好，没有炸。
  我的液氮罐是10L的，里面大概还有1/3的液氮，想把布袋子捞出来，可是液氮汽化的白色让我们不可能看到什么，于是找了个小些的液氮罐把液氮转移，可结果是小管子都从布袋子里跑出来，流向另一个液氮罐了，索性用铁钩伸进去把布袋拉破，让所有的小管子进入另一个罐子。
  然后分了好几天，每天从那个小些的液氮罐里倒出些管子进入不锈钢保温杯，然后用镊子从保温杯中捏出管子放进冰箱，我们一次倒出4-6个，然后等待2分钟，没有声音，再倒出4-6个...当冰箱温度下降到<-70的时候就不倒了，不然会对别的同学的标本保存造成不利，收工，等第二天再重复这样的事情，终于，最后所有的管子都放好了，长长出了一口气。
  我不知这就是事情的解决办法，还是凭了运气（因为我收集的还是有很多冻存管装的，而且从一个液氮罐往另一个倒的时候掉在地上了几个EP管，侥幸没有裂），但是有一点清楚的是放在-80要比取出直接常温爆裂率要小很多，会降低些损失。
  与大家共勉！

• fox_79 (2015-7-02 17:46:43)

  
  终于把所有的管子都安全转移了，虽然这个帖子已经沉了，但要兑现自己的承诺，写下来，以让后来的师弟师妹们有个参考意见：
  根据楼上各位热心给出的意见，我决定还是放-80°，我还有两布袋子的标本（那种长长窄窄的自制布袋），当时由于罐口小，两个布袋子挤在一起，我用力用镊子拽住一个使劲往外拉，液氮中泡久了布变得很脆，一个布袋子被我撕断了，绑绳子的袋头被我捞出来了，所有的小管子都随剩下的袋子散了下去。
  换了个长长的洗试管的刷子，把破了的袋子捣下去，这样才顺利的把另一个布袋一下抽了出来。我们是两个人，一个人把布袋提出来，一个人就迅速打开-80°冰箱，把布袋放了进去。放的瞬间听到了布袋发出嗤嗤的声音，快快关上冰箱门，等了5分钟。时间过的好慢啊，一点动静我都很敏感，还好，没有炸。
  我的液氮罐是10L的，里面大概还有1/3的液氮，想把布袋子捞出来，可是液氮汽化的白色让我们不可能看到什么，于是找了个小些的液氮罐把液氮转移，可结果是小管子都从布袋子里跑出来，流向另一个液氮罐了，索性用铁钩伸进去把布袋拉破，让所有的小管子进入另一个罐子。
  然后分了好几天，每天从那个小些的液氮罐里倒出些管子进入不锈钢保温杯，然后用镊子从保温杯中捏出管子放进冰箱，我们一次倒出4-6个，然后等待2分钟，没有声音，再倒出4-6个...当冰箱温度下降到<-70的时候就不倒了，不然会对别的同学的标本保存造成不利，收工，等第二天再重复这样的事情，终于，最后所有的管子都放好了，长长出了一口气。
  我不知这就是事情的解决办法，还是凭了运气（因为我收集的还是有很多冻存管装的，而且从一个液氮罐往另一个倒的时候掉在地上了几个EP管，侥幸没有裂），但是有一点清楚的是放在-80要比取出直接常温爆裂率要小很多，会降低些损失。
  与大家共勉！

• chengjie79 (2015-7-02 17:47:10)

  放样品前，现在空管上用针头扎个小洞，这样就不会“爆炸”了。

• dior (2015-7-02 17:48:22)

  尽量不要把EP管直接放入液氮中，即使是进口的EP管，于液氮中还是非常可能变形，液氮进入管中，取出时转为气态，压力迅速升高，非常容易爆。这不仅对标本是一种损失，最重要的是威胁到人的安全，所以应该戴面罩及防冻手套等保护措施。
  我们都使用进口的冻存管（贵一些），会安全很多。

• october7 (2015-7-02 17:49:18)

  
  取样时EP管要盖紧才能放进液氮罐，液氮进入EP管取出时就容易爆

• am10 (2015-7-02 17:49:43)

  
  我冻融过也许多次了，没有发生过爆的问题，冻存管都是用封口膜封的。我冻得细胞融时都是直接放入37度水浴，没出现过问题
  我不建议渐融，我认为这样做会丧失活性

• fox_79 (2015-7-02 17:52:11)

  QUOTE:

  原帖由 am10 于 2015-7-2 17:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  我冻融过也许多次了，没有发生过爆的问题，冻存管都是用封口膜封的。我冻得细胞融时都是直接放入37度水浴，没出现过问题
  我不建议渐融，我认为这样做会丧失活性 ...

  说的有道理，可是短时间放在-80度我想也是可取的，不是还有种储存方法是在液氮中迅速冷冻后马上放入-80°冰箱吗，对不？我的试验基本上快结束了，从结果上看，标本还是基本上没有受显著影响的。
  有一点我蛮想不通，有人说管口一定要密封，还有人说要戳小洞，到底应该怎样呢？
  不过我爆裂的管子中也有用蜡膜封过的，而且曾经出现裂痕但没有爆开的EP管，从-80度取出后也出现过爆裂的情形，大家试验一定要小心，保护好自己！

• xevin (2015-7-02 17:52:58)

  
  下次再放液氮可要戴防护眼镜，太危险了，生命最重要。

• u234 (2015-7-02 17:55:48)

  
  看过以上帖子，发现液氮使用真是挺恐怖。我现在是用液氮冻存组织，还好是用锡箔纸包裹，随后液氮研磨提取RNA，但每次从液氮罐往外倒液氮时，都会有少量喷溅出来，溅到脚上或手上，针扎的感觉，恐怖恐怖

• NBA (2015-7-02 17:58:04)

  
  我们用冻存管装组织到现在还没有爆过，一般在液氮里面放一夜，第二天从液氮里面拿出来之后放到冰上直接送-80保存，到现在还没爆过！