【求助】DGGE图谱多一条相同条带问题

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【求助】DGGE图谱多一条相同条带问题
不同纯培养的菌株,经PCR扩增16S rDNA V3区后,跑DGGE除目标条带外,都多一条相同的条带,在同一位置,但条带较目标条带模糊,大家遇到过类似情况吗?帮帮我吧~~
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最新回复

  • greenbee (2016-2-17 11:43:04)

    有可能是非特异扩增,还有可能是模板。应该胶回收再上dgge
  • xyw5 (2016-2-17 11:43:22)

    我在做几株纯菌DGGE的时候,在目标条带的下方都有一条带,各条带的位置也相同。条带比目标条带相比较模糊。应该与楼主的问题相同……
  • 小游abc (2016-2-17 11:43:44)

    QUOTE:

    原帖由 xyw5 于 2016-2-17 11:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
    我在做几株纯菌DGGE的时候,在目标条带的下方都有一条带,各条带的位置也相同。条带比目标条带相比较模糊。应该与楼主的问题相同……
    那你后来是怎么消除的?
  • 小游abc (2016-2-17 11:44:00)

    QUOTE:

    原帖由 greenbee 于 2016-2-17 11:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
    有可能是非特异扩增,还有可能是模板。应该胶回收再上dgge
    PCR时得到的条带很单一,没有非特异扩增啊,是否模板的问题还不清楚,我试试割胶回收。谢谢~
  • redbutterfly (2016-2-17 11:44:24)

    我们实验室,纯菌最近都跑出好多条带,不知道是什么原因
  • 小游abc (2016-2-17 11:44:48)

    QUOTE:

    原帖由 redbutterfly 于 2016-2-17 11:44 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
    我们实验室,纯菌最近都跑出好多条带,不知道是什么原因
    实验结果有时真的让人意想不到,唉!
  • ujne (2016-2-17 11:45:03)


    你们找到结果了吗?
  • 天蓝蓝 (2016-2-17 11:45:35)

    北京华美锐是一家专门代做DGGE实验的单位
    1.技术路线如下﹕
    客户提供样本,公司负责从样本中提取DNA,设计与合成检测片段特异性PCR引物, PCR扩增,PCR产物纯化,变性梯度凝胶电泳,PAGE切胶回收,二次PCR扩增, ...

    ====================================================

    你们公司这么强大吗
    那你帮人家分析下结果噻,省的我们这帮人天天不知道怎么办
  • yychen (2016-2-17 11:45:52)

    你可以做一个pcr的阴性对照 在跑dgge时候顺便跑阴性对照 看看是不是本来阴性就会跑出条带 我做细菌341f/518r纯菌就有多条带 然后跑阴性dgge就发现多的条带与阴性对照条带是对应的。
  • txwuyan (2016-2-17 11:46:16)

    同遇到纯菌,跑出很多条带的问题,求解
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