【求助】求高手给分析下改变那些条件才能使条带清晰

最新回复

• douding66 (2015-4-02 20:23:31)

  是PCR结果么？非特异性条带太多，建议提高退火温度，检查引物特异性，降低循环次数，或者采用前5个循环较高退火温度，后25个循环稍低退火温度，可增加特异性

• sunshine039 (2015-4-02 20:23:50)

  
  谢谢，是PCR结果，退火温度58,36个循环，还有这是三个引物，前三个是一个引物，中间三个是一个引物，后三个是一个引物

• bling (2015-4-02 20:24:11)

  
  你是做梯度？还是检测目的基因？

• 3648755 (2015-4-02 20:24:38)

  
  第一点：提高模板质量。第二点：反应液中加入5%左右的DMSO（我做实验常用，感觉很有效果，可提高特异性），退火温度可用58℃和60℃。第三点：你的反应体系是多少？本人建议用10ul体系。第四点：引物特异性不好。希望能够帮得到你。
  

• viviwang1987 (2015-4-02 20:25:09)

  
  这种情况换个照胶的仪器会好点

• xueyouzhang (2015-4-02 20:25:26)

  
  小体系做个梯度看看是不是特异性问题
  

• panda王 (2015-4-02 20:26:09)

  
  提高退火温度试试

• 969 (2015-4-02 20:26:30)

  使用WeGo这个在线软件就可以了