【求助】怎么除去样品中的蛋白质

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-10-31 15:58 作者: yyaxw84 来源: 分析测试百科网

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【求助】怎么除去样品中的蛋白质

各位大侠，小弟想除去氨基酸中的蛋白质，然后进氨基柱分析氨基酸，请问有什么好方法可以除去蛋白质，谢谢。。

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最新回复

junhun (2014-10-31 15:58:33)

你是血浆基质吗？一般三种方法去除：（1）有机溶剂沉淀蛋白（2）乙酸乙酯萃取（3）SPE固相萃取。
1472583690 (2014-10-31 15:58:52)

乙醇沉淀法，三氟三氯乙烷法和Sevag法（用氯仿：戊醇或丁醇4：1混合）。或者加酸水解让蛋白质水解成氨基酸
yyaxw84 (2014-10-31 15:59:11)

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原帖由 junhun 于 2014-10-31 15:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
你是血浆基质吗？一般三种方法去除：（1）有机溶剂沉淀蛋白（2）乙酸乙酯萃取（3）SPE固相萃取。
我们分析的是氨基酸药类，里面含有的酶对分析结果有干扰，就想把酶除去。我们试过乙腈沉淀蛋白，但好像除不干净，还是有干扰。也想过SPE,SPE能萃取完全吗？
yyaxw84 (2014-10-31 15:59:31)

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原帖由 1472583690 于 2014-10-31 15:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
乙醇沉淀法，三氟三氯乙烷法和Sevag法（用氯仿：戊醇或丁醇4：1混合）。或者加酸水解让蛋白质水解成氨基酸

您好，我们是测氨基酸药类里的氨基酸，氨基柱，流动相：乙腈：磷酸二氢钾=60:40，水解成氨基酸应该不行，乙醇沉淀法，三氟三氯乙烷法和Sevag法（用氯仿：戊醇或丁醇4：1混合）哪个更合适点呢？谢谢
dragonkilly (2014-10-31 15:59:48)

乙醇沉淀法，使蛋白质聚沉
yyaxw84 (2014-10-31 16:00:12)

QUOTE:
原帖由 dragonkilly 于 2014-10-31 15:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
乙醇沉淀法，使蛋白质聚沉
乙醇和乙腈哪个效果更好些？除的越干净越好。。。
junhun (2014-10-31 16:00:44)

您好，我们是测氨基酸药类里的氨基酸，氨基柱，流动相：乙腈：磷酸二氢钾=60:40，水解成氨基酸应该不行，乙醇沉淀法，三氟三氯乙烷法和Sevag法（用氯仿：戊醇或丁醇4：1混合）哪个更合适点呢？谢谢...

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乙醇沉淀法
misswu61 (2014-10-31 16:02:45)

可以尝试用蛋白酶把你的杂蛋白降解
yyaxw84 (2014-10-31 16:03:20)

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原帖由 misswu61 于 2014-10-31 16:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
可以尝试用蛋白酶把你的杂蛋白降解
额。我们相除去的就是胰酶。
eric930 (2014-10-31 16:03:49)

我们分析的是氨基酸药类，里面含有的酶对分析结果有干扰，就想把酶除去。我们试过乙腈沉淀蛋白，但好像除不干净，还是有干扰。也想过SPE,SPE能萃取完全吗？...

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方法合适，萃取的应该是比较完全。你们买固相萃取柱时，可以找他们的应用咨询氨基酸测定方法。
IAM007 (2014-10-31 16:04:20)

乙醇和乙腈哪个效果更好些？除的越干净越好。。...

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乙腈毒性太大还是用乙醇吧，而且乙腈在酸碱存在下容易分解
any333 (2014-10-31 16:04:35)

超滤和SPE都可以解决，超滤更快
yyaxw84 (2014-10-31 16:04:54)

方法合适，萃取的应该是比较完全。你们买固相萃取柱时，可以找他们的应用咨询氨基酸测定方法。...

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谢谢，现在正考虑用超滤试试，不过好像成本挺高。
dragonkilly (2014-10-31 16:05:20)

可以使用磁珠法吸附出蛋白，然后剩下的就是氨基酸啦~~~
或者可以使用磁珠提取出目的氨基酸。