质谱沙龙第六期活动报道
2008年3月30日下午，质谱沙龙第六期活动在北京第二炮兵总医院制剂楼举行。这个系列活动已经举办了五期，由二炮总医院、北京师范大学质谱中心和AB公司共同发起和组织，由AB公司赞助，以专题报告和讨论为主，参与者均为从事液质联用工作的一线实验人员，互相交流仪器使用和应用方法的经验和心得。此次到会者分别来自二炮总医院、北京师范大学、军事医学科学院、西苑医院、朝阳医院、北大医学院、北医三院、空军总医院、北京益科生公司、SGS北京公司、AB公司等。分析测试百科网参加了该次活动。
质谱沙龙第六期现场
口水看病有望实现？——唾液的蛋白质组学
来自应用生物系统AB公司的市场开拓专员 李丹博士，作了题为《唾液的蛋白质组学》的报告，并在报告中分享了很多日常进行科学研究的经验感受。
首先，李丹 博士引用了发表在北青报上的一篇报道《蛋白质组图已绘出，唾液测试必将取代抽血化验》，引起在场各位的浓厚兴趣，因为在场有多位来自于医院的质谱用户，他们诊断检测和常规监测样本，都来源于血液取样。李丹博士首先介绍了这一研究的大概内容。美国牙医学会和美国卫生部资助了三个研究小组：第一组：美国Scripps研究所及罗切斯特大学；第二组：南加州大学；第三组：加州大学圣弗朗西斯科分校。三家分别利用已有的蛋白质组学平台开展唾液蛋白质组学研究，探索用唾液采样、蛋白质组学分析，找到生物标记物，从而开展疾病临床诊断的新方法。
研究员采集了23名健康男性和女性的腮腺、下颌下腺和舌下腺分泌的唾液。三家利用不用的前处理路线和质谱平台技术开展研究。比如第一组采用了较多步骤的前处理技术，利用LCQ、LTQ、LTQ Orbitrap质谱平台和SEQUEST检索平台；第二组、第三组采用了较简易的前处理方式，用Qstar和4800 TOF/TOF质谱分析和MASCOT检索平台。他们共鉴定出1,116种蛋白质。研究人员把这些蛋白质与血液、眼泪中含有的蛋白质对比后发现，唾液含有的某些蛋白质与血液中影响老年痴呆症、乳腺癌和糖尿病等的蛋白质相匹配。罗切斯特大学医药中心研究员弗雷德•黑根说，唾液中20%的蛋白质与血液所含蛋白质相同，“这里面有许多（蛋白质）可以用作临床疾病诊断”。研究人员认为，此次试验得到的唾液蛋白质数量已足以制成基本的唾液蛋白质组图，用作健康人和病患的对比。
李丹博士特别引用了一个对临床诊断特别有帮助的例子，比如测定女性唾液中的c-erbB-2或HER2/neu的肿瘤标记物，来开展乳腺癌诊断。如果唾液中肿瘤标记物的含量升高，则强烈提示可能有乳腺癌。研究人员分离了可溶性唾液形式的HER2/neu蛋白，并分析了125个乳腺癌患者、乳房良性肿瘤和健康对照者唾液中的HER2/neu水平，结果发现87%的乳腺癌患者HER2/neu水平升高。此项研究标明，唾液诊断由于非常简便，因此是以后的一个趋势，其前景非常可观。唾液看病不仅方便，而且价格也不贵。在乳腺癌检测手段上，唾液测试有望最终取代让人不舒服且价格昂贵的乳房X射线检测。
李丹博士现场报告
针对大家的踊跃提问，李丹博士还向大家简要介绍了蛋白质组学的两种研究策略：“bottom-up”策略和“top-down”策略。以上研究和目前现行的各种实际体系的研究成果，大多基于Bottom-Up策略，但许多研究者在力图开发新的研究技术Top-down策略。
在上述的研究成果中，第一组由于前处理比较细致，所以总的研究成果是相对最好的。该实例表明了前处理工作在蛋白质组学研究中的重要作用。原始文献的来源为：The Proteomes of Human Parotid and Submandibular/Sublingual Gland Salivas Collected as the Ductal Secretions，Proteome Res., March 25, 2008
下载报告：
相关链接
蛋白质组图已绘出，唾液测试必将取代抽血化验
蛋白质与蛋白质组学群组
唾液的八大功能
原人参二醇临床前药代动力学试验研究报告
来自第二炮兵总医院药剂科的李鹏飞老师作了《原人参二醇临床前药代动力学试验研究》，首先介绍了研究背景，然后从吸收动力学、组织分布、血浆蛋白结合率、排泄和代谢几个方面介绍了原料药的体内研究，最后介绍胶囊的体内研究。
这是一个严格按照标准程序做的实验流程，在场的多位听众，尤其是来自医院的用户都比较了解。但在讨论中，有几个比较有意思的议题，撷取如下：
（1） 李老师在质谱实验中应用了“套打法”（原吉林大学博士 王英武在博士期间发明的方法），大大节省了实验的时间。这种方法开展的前提是液相等度实验，通过对液相尤其是自动进样器的设置，以及质谱采集的相关设置，可以把每次出峰时间控制在2分钟之内，同时仍获得满意的药动实验效果。
下载报告：
自动进样器套打法说明
（2） 听众中有人提问，李老师是否在实验中比较过液相DAD检测器和质谱的效果。经过大家的讨论，大多认为液质联用做药动实验，主要是利用质谱高灵敏度，因此对于样品取样少的优点。所以，在药动实验中，如果对于灵敏度要求不高，就用液相色谱做，因为在较高浓度区，是HPLC的擅长；而对于灵敏度要求高的项目，用液质联用做，这时往往液相DAD根本就检测不到。这两者并不需要比较，因为有各自擅长的浓度区间和项目要求。
（3） 看到李老师演示的“漂亮”的质谱图，听众中也有人问到质谱图的处理问题。李简要介绍了如何从AB质谱中将原始质谱图数据“导出”，到ppt中进行处理的方法，并欢迎大家讨论。
下载：
从Analyst中导出图到ppt
新药研究开发的程序
来自北大医学院药剂科的许俊羽老师为到场的专家学者详细地讲解了《药品研究开发的程序》。药品开发主要包括：发现苗头化合物，非临床研究，申请临床研究，Ⅰ期临床实验，Ⅱ期临床实验（治疗作用初步评价阶段），Ⅲ期临床研究（治疗作用确证阶段），获得上市许可，Ⅳ期临床实验（新药上市后研究）几个步骤。这个报告对于大家按照GLP和GCP规范，开展试验有很强的指导意义，可提高大家对于流程和规范的重视，使大家少走弯路。许俊羽老师所在的医院，每年可以做十余例类似的项目，在这方面积累了大量的经验。
下载：
药物临床试验与GCP
用先进分析技术指导临床诊断和治疗——二炮医院活体移植成功案例
前不久，中央电视台十套《科技之光》节目为二炮医院专门做了一期关于肝脏活体移植的报道。在此次沙龙活动中，到会的专家学者一起重温了该例成功的手术前后的整个过程。该例手术是外科医生和药剂科通力合作的成功代表作。从早期诊断时，药剂科就为确定病人的代谢类型立下了汗马功劳，制定了良好的给药方案。在术后消除排异反应的用药中，药剂科又利用液质联用技术，成功地、实时监测血药浓度，为合理用药提供了决策依据。这个病例向大家讲述了一个感人至深的真实故事：晚年丧妻不久、肝功能衰竭的病人不但手术成功，而且两周后顺利出院，至今生活美满，直至找到了生活的另一半。在此，我们由衷地向白衣天使们致敬，也向为白衣天使们提供决策依据的二炮药剂科的分析工作者致敬！是他们，使生命垂危的病人们获得了新生！
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