环渤海第一届曁天津市第十九届色谱学术大会报告

2010-9-26 20:03 来源: 分析测试百科
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首届环渤海色谱学术交流会胜利召开

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首届环渤海色谱学术交流会厂商报告


  2010年9月24-26日,环渤海第一届曁天津市第十九届色谱学术报告会-仪器展览会在风景秀美的天津市蓟县黄崖关长城脚下隆重开幕。大会期间,来自环渤海地区的色谱专家做大会报告,介绍 了色谱质谱技术及其应用等内容。下面对专家的精彩报告予以报道。

蛋白质样品预处理方法进展

中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心 张玉奎 院士

  中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心张玉奎 院士作了题为《蛋白质样品预处理方法进展》的报告,主要介绍了通用性富集、选择性富集选择性富集和膜蛋白预处理等三种蛋白质样品预处理方法。

   通用性富集方法一般包括蛋白质均衡技术和介孔杂化C8磁性纳米颗粒技术。基于六肽库的蛋白质均衡技术可显著降低蛋白质的动态分布范围,但蛋白质与配基库 结合的特异性有限,易造成假阳性或假阴性结果。而基于单链可变区片段(scFv)文库为配基的蛋白质均衡器有三个优点:1)106种scFv片段,每种 106个;2)单链可变区片段(scFv)与蛋白质结合的特异性和强度都比六肽强;3)固载的文库可通过感染病毒进行复制扩增。另外还有亲水基质蛋白质均 衡器,和以两性电解质作为配体、磁性纳米材料为基质的新型均衡器等。接着,张院士举了一个人血清中蛋白质鉴定的例子。结果显示:与原始样品相比,每个馏分 都都能鉴定到更多数量的蛋白质;样品经蛋白质均衡器处理后,白蛋白丰度显著降低;蛋白质鉴定数目提高了3~4倍。

  选择性富集方法包括蛋 白质印迹材料、杂化固载金属亲和色谱(IMAC)整体材料和金属氧化物气溶胶等三方面内容。分子印迹法是指以球形大孔硅胶为基质,将模板蛋白——猪血清白 蛋白(PSA)与甲基丙烯酰胺和甲基丙烯酸为功能单体,甲叉双丙烯酰胺为交联剂的聚合物溶液先后抽入硅胶孔道内,自由基引发进行聚合反应。反应结束后,用 NH4HF2刻蚀硅胶后,将聚合物洗用纯水至中性,晾干,得到外形与硅胶形状互补的印迹微球。杂化整体IMAC 材料对α-酪蛋白酶解产物(磷酸化肽)具有很好的选择性,而且载样量可达2.6mg/mL,回收率为68.9%。

  膜蛋白质在外界物质识 别、运输以及信号传到等方面具有重要作用。据估计,药物靶点中,大约有2/3为膜蛋白质。基于离子液体的膜蛋白质样品预处理技术所选用的离子液体是1-丁 基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐(BMIM BF4),这是一种常用的离子液体,极性和甲醇相近(甲醇:77;BMIM BF4:67),结构和表面活性剂相近(亲水+疏水基团),易于去除(C18捕集性)。现有膜蛋白质处理技术中 BMIM BF4方法可以鉴定到更多的跨膜蛋白质,与Urea及Rapigest方法比,可以分别提高80%与25%,与SDS和Methanol方法比,可以提高 3倍以上。鉴定的跨膜蛋白质比较:BMIM BF4方法鉴定所得跨膜蛋白质分别包含SDS、Methanol、Urea和Rapigest方法所鉴定跨膜蛋白质85%、74%、74%、71%。


高分辨色谱与质谱技术在持久性有机污染物分析中的应用

中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室 江桂斌 院士

  中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室江桂斌院士作了题为《高分辨色谱与质谱技术在持久性有机污染物分析中的应用》,主要介绍了持久性有机污染物(POPs)的特点和种类、高分辨色谱质谱技术在环境监测中的应用、新型污染物的筛选及识别技术及未来研究所面临的各种挑战等四方面内容。

  化学污染物在很长时间内是环境污染的主体,包括难挥发的重金属、离子化合物、表面活性剂和高聚物等,易挥发的室内、空气污染物等,以及半挥发的持久性有机 污染物。在整个有机污染物中,POPs虽然只占2%的比例,但由于它难降解、长距离迁移、在生物体内含量增大、毒性大等特点,对环境和人类产生较大的危害。大部分新POPs 物质不仅可以在环境中长期存在,而且可以通过大气、水体或其它途径传播到各个区域。同时,由于这些污染物均具有较强的亲脂性,容易在食物 链中逐级放大,产生强烈的累积效应。除此之外, 这些新POPs 物质具有类似的毒性终点, 不仅具有致癌、致畸、致突变性,而且还具有内分泌干扰作用。目前,联合国UNEP 已将五溴联苯醚、八溴联苯醚、PFCs 等化学品列入《斯德哥尔摩公约》受控名单。

  POPs的结构复杂、含量低、毒性差别大,目前一般采用高分辨色谱和质谱技术进行这方面的研究。如二恶英有210种、多氯联苯209种、多溴联苯醚209中,而且含量在ppt或ppb级,因此,测定POPs 是环境分析化学最复杂和最困难的工作。目前江院士已掌握了12种经典POPs的分析,而毒杀芬种类繁多,具有立体结构,其分析仍是现代有机分析的难题。现 在我们已发展了同时测定Dioxins、PCBs和PBDEs的方法体系,建立了各种介质中PFCs的高灵敏度分析方法、SCCP的分析方法等。

  江院士在新型污染物的筛选及识别技术方面开展了一些工作,通过下述三种不同的技术途径筛选到一些新的污染物并开展了有关毒理学的前期研究:1)基于化合物定 量结构-物化性质相关模型(QSPRs) 对环境中新型PBT物质的鉴别。2)基于质量平衡关系筛选和鉴别新型污染物。3)生物效应引导的新型污染物识别方法。通过将多维化学分析与毒性测定仪器相 结合,研制出用于EDA 的成组毒理学分析仪(Integrated Toxicology Analyzer),并建立了以发育神经毒性为检测终点,环境样品中溴代阻燃剂等复合有机污染物的毒性筛选及识别方法。

  我国对于新POPs 问题准备十分不足,基础工作相当薄弱,缺乏标准的分离测定和分析方法及其质量保证体系。由于新型污染物通常浓度较低、组分复杂, 而且干扰物质较多,因此,对分析技术有更高的要求,发展高灵敏度和高选择性的分离分析方法是解决问题的主要出路。在对POPs的研究中,主要面临环境中存在的难电离物质分析、基质干扰、甲基等不稳定代谢产物的检测、高分离色谱与高分辨质谱的结合、同位素质谱为环境分析等五方面挑战。