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关注激光共聚焦超高分辨显微学年会 领略微观世界精彩

2018.3.20

  分析测试百科网讯 北京市2018年度激光共焦超高分辨显微学学术研讨会在北京天文馆举行,会议由北京市电镜学会和北京理化分析测试技术学会主办。本次会议旨在推动激光共焦超高分辨显微学的进步和发展,提高广大相关工作者的学术及技术水平,促进上述学科在生命科学等领域中的应用、发展和交流。两百余位专家学者、近十家显微镜厂商参与本次会议;共16位专家、工程师为参会听众做出精彩报告。

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北京理化分析测试技术学会秘书长桂三刚为本次会议致辞

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本次会议主持人 北大医学部教授何其华

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签到处

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会议现场

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北京大学工学院特聘研究员 陈匡时

  首先由北京大学工学院特聘研究员陈匡时带来题目为“单分子成像技术在RNA研究中的应用”的报告。陈匡时在报告中指出,目前有三种常见的RNA成像方法,即MB、MS2和FISH。他们在研究中主要使用MBs(Molecular Beacons)方法,其优势在于1. 不需要移除未绑定的探针;2. 能够基于大范围的识别从而产生高信噪比。然而,传统MBs方法不能用于敏感RNA成像,因此课题组做出以下改进,1. 使用共轭大分子消除假阳性信号,2. 优化MB骨干化学。最终,课题组使用2Me/PSloopMBs在单分子水平研究RNA,其潜在优势(相比于MS2方法)能掺入更亮的荧光物质;更小的分子量;更短的标记。

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ISS公司技术经理 孙元胜

  接下来由ISS公司技术经理孙元胜带来的汇报,题目为“时间分辨的超分辨荧光显微镜及相关应用”。首先,孙元胜介绍了STED的原理,之后介绍了使用FastFILM技术的时间分辨STED成像技术并与其它成像技术做出比较,并对时间分辨STED成像优势给出详细说明。接下来孙元胜对时间分辨STED和相量图做出解释。最后,他介绍了ISS公司的经单束STED激光修饰的双束STED成像技术,并表示这是一种比较先进的成像手段,能够允许更高的光计数率,也能够准确的测量快速动态分子,最后使用这种技术能缩短数据获取时间以降低光中毒现象。

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中科院生物物理所研究员 李岩

  由中科院生物物理所研究员李岩带来题目为“神经分子机制研究中显微成像技术的应用与需求”的报告。首先,李岩通过展示神经发育与神经退行疾病的显微成像图向观众展示这项技术在研究中的应用。接下来,通过展示展示果蝇研究表明,共聚焦显微镜通过钙成像功能可以对神经网络进行整体记录,也可以对神经元的不同分区进行精细分辨,但这项技术无法获得神经元的快速反应和神经编码细节,但通过过电压敏感成像技术使高分辨、高速度成像成为可能。

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徕卡公司工程师 王怡净

  由徕卡公司工程师王怡净带来的报告题目为“光谱式共聚焦的最新进展”。首先王怡净介绍了公司最新的光谱式共聚焦成像产品,即SP8 DIVE。这款产品能够提供多样本的深入观察;能够使用不同样品的需求;提供4路光谱自由度。接下来介绍了SP8 FALCON产品,这款产品能对荧光寿命进行光谱式测量,从而反映分子构象改变、分子相互作用(FRET)、分子微环境改变(如pH值、离子浓度、氧含量)、代谢改变(如NADH)、膜电位等,尤其值得一提的是,它可以进行实时FLIM,如快速钙振荡,这是传统FLIM成像无法做到的。

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北京大学分子医学研究所教授 陈良怡

  由北京大学分子医学研究所教授陈良怡带来的报告题目是“Ultrasensitive Hessian structured illumination microscopy enables ultrafast and long-term super-resolution imaging”。陈良怡在报告中指出,目前SR技术存在以下三点问题,1. 更高的分辨率需要更多的光子,2. 更多的光子需求导致更多的光损伤,3. 更多的光子需要更多的时间。因此研究团队研发了SIM SR技术。这项技术拥有85 nm的空间分辨率,而光照度少于点扫描共聚焦显微镜1~3个数量级;在188 Hz频率下,通过10分钟连续成像,可以获得18万张超高分辨率图像;拥有最长时间的超高分辨率成像;能够观察活细胞内的新结构动态;定量活细胞动态过程。这项技术有助于研究者获得更好的分析数据。

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尼康公司工程师 周建春

  由尼康公司工程师周建春带来题目为“尼康活细胞成像解决方案”的报告。其中包括新型倒置显微镜、转盘共聚焦显微镜和快速高分辨率共聚焦显微镜。新得而倒置显微镜产品拥有25 mm的视野,改进的凸轮连杆,智能化的调教方式以及第四代PFFS成像技术。新型转盘显微镜拥有最大2000fps的扫描速度,新的大型转盘以及独有高速下的高分辨力。最后周建春以果蝇卵细胞分裂为例像听众介绍相关产品。

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中科院微生物所研究员 孔照胜

  由中科院微生物所研究员孔照胜带来的报告题目是“解码微管精准切割机制”。孔照胜以植物微管精准切割机制为契机,向听众介绍(微管骨架)MT技术在活细胞机理以及成像技术的应用。孔照胜以改变KTN80为目标,发现四种KTN80在植物发育中扮演冗余角色,然而KTN1突变体中KTN80四突变系表现出严重发育迟缓。因此通过对KTN80的成像研究发现,KTN80发挥精确制导作用,将KTN80-KTN1靶向切割位点;通过KTN1多聚化,实现微管精确切割。

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奥林巴斯公司工程师 戚少玲

  由奥林巴斯公司工程师戚少玲带来题目为“活细胞超高分辨成像系统SsinSR”的报告。在报告中,戚少玲介绍了最新的活细胞成像系统SpinSR10。通过与其它技术比较后表示,这项技术非常适合在活细胞成像使用。SpinSR拥有以下几项优势,1. 拥有120 nm XY分辨率,2. 快速成像(30-100 fps),3. 硅油物镜适合深层成像(50 μm),4. 多成像模式系统。

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北京大学生命科学学院博士 蒿慧文

  由北京大学生命科学学院博士蒿慧文带来的报告题目是“高尔基关联微管为E-cadherin囊泡运输提供特化轨道且参与细胞定向迁移的维持”。蒿慧文表示,高尔基体在极化象限中更加活跃。此外,通过活细胞与STROM成像技术结合,解决了高尔基体在(微管骨架)MT上的轨迹问题。另外,通过基因技术,蒿慧文发现高尔基体产生MT需要细胞质链接蛋白(CLASPs),GaMTs是帮助物质运输到细胞边缘的物质之一,E-cadherin也有助于细胞物质的转移。

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蔡司公司工程师 张然

  由蔡司公司工程师张然带来的报告题目是“激光片层扫描显微系统(Lightsheet Z.1)在组织透明化样品成像中的应用”。张然表示,Lightsheet Z.1是一种用于活体及大型固定样品3D成像方案,它可以用于大体积样品的组织透明化成像;对于光学切片,设备拥有双侧照明技术,多视角成像技术。此外,公司整合了用于3D视图及图像分析软件Arivis vision 4D,以方便使用者分析获得的数据。

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中科院生物物理所研究员 徐平勇

  接下来由中科院生物物理所研究员徐平勇带来题目为“SIMBA 活细胞超高分辨显微成像”的报告。徐平勇介绍到,PALM(光激活定位显微镜)是实现细胞中大量荧光分子只有一个分子发光的一种技术。团队通过光活化荧光蛋白(PAFPs)中的mEos2物质达到好的检测效果。此外,团队使用mEos3.1、mEos3.2来提高检测效果。通过与SIMBA技术相结合,可以达到50 nm的分辨率;更大的成像范围;进行活细胞成像以及1秒的时间分辨率。因此,SIMBA技术使用用TIRFM、PALM以及STORM的SR技术。

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德国JPK公司工程师 樊友杰

  由德国JPK公司工程师樊友杰带来的报告题目是“原子力显微镜与超高分辨光学联用最新进展”。樊友杰首先介绍了JPK的NanoWizard产品。他表示,这款产品通过一次成像就能获得杨氏模量、高度、光学图像以及零接触力表面成像。此外,这款仪器可以与市面上的各类光学仪器相结合进行联用。如果与超高分辨的STED联用可以做到同区域成像和同区域操纵;与拉曼光谱联用可以增强拉曼光谱信号,可以提高拉曼的空间分辨率至纳米数量级。

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清华大学生命科学学院研究员 欧光朔

  接下来由清华大学生命科学学院研究员欧光朔带来的报告题目为“线虫神经前体细胞发育机制的成像和遗传学研究”。欧光朔通过研究发现细胞通路如何激活微丝组装。此外,课题组又建立了体外重建系统。课题组通过对IFT-dynein的研究发现他的突变与人类的一些疾病密切相关。课题组也发现纤毛的运动范围很大,有多种物质参与其中的控制。

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蒂姆温特公司工程师 李小煜

  由蒂姆温特公司工程师李小煜带来的报告题目为“高灵敏低损伤光片显微镜技术探讨”。李小煜表示,light-sheets是目前唯一可以做到长时间拍摄活细胞而不损伤细胞的技术。这项技术可以达到2k*2k的分辨率以及任意一点Z平面的照明。此外,这套系统可以通过平面模式和线模式进行观察。最后,李小煜表示,由于这套系统产生的数据量很大,公司研发了相应的数据处理站,配合arivis vision 4D软件可以很快的得到所需结果。

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阜外医院国家心血管中心博士 聂宇

  由阜外医院国家心血管中心博士聂宇带来的报告题目是“急性炎症在心机再生中的作用与机制”。聂宇表示,各类心血管疾病会造成损伤,而心肌损伤的实质是心肌细胞大量丢失,最后导致心力衰竭。然而,传统手段无法挽回丢失的心肌细胞,因此心机再生是攻克心衰的有效手段之一。课题组通过研究发现,IL-6基因是控制小鼠心机再生的关键,它与STAT3信号密切相关。敲除STAT3会导致心肌细胞的增值能力下降,大幅降低恢复能力,最终导致心脏组织硬化,造成心衰。

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通用电气公司工程师 Jaron Liu

  最后,由通用电气公司工程师Jaron Liu带来题目为“DeltaVision OMX SR Blaze-SIM活细胞超高分辨显微成像技术最新应用进展”的报告。Liu在报告中表示,由于生物基础研究中的纳米尺度研究需求导致SR技术的出现,因此通用电气公司的 3D-SIM技术很好的满足了这种需求。这种技术无需改变被测物体,也无需在图片中手动校准。此外,设备优化了光学视角以及配备了多达4台摄像机以便获得高速SIM成像。最后,通过对OMX SR优化,GE达到了100 nm的分辨率。

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通用电气公司展台

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卡尔蔡司公司展台

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奥林巴斯公司展台

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徕卡公司展台

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蒂姆温特远东公司展台

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世纪桑尼公司展台

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尼康公司展台

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JPK公司展台

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东方科捷公司展台


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