【求助】HPLC色谱图中出现两个负峰是怎么回事？

最新回复

• join (2014-10-31 16:35:51)

  原因我也不是很清楚，但是碰到这种问题我会重配流动相，并对柱子进行冲洗。可能跟柱子有关系吧

• ha111 (2014-10-31 16:36:14)

  我的样品峰保留时间在3.110，就是图上那个比较高的峰...
  
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  那就是你的样品峰把那个倒峰盖掉了，你现在这样做液相肯定是不行的

• 鹿奔奔 (2014-10-31 16:36:46)

  QUOTE:

  原帖由 join 于 2014-10-31 16:35 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  原因我也不是很清楚，但是碰到这种问题我会重配流动相，并对柱子进行冲洗。可能跟柱子有关系吧

  但是在跑样品的时候就没有第二个负峰了？这是怎么回事呢？

• join (2014-10-31 16:37:11)

  QUOTE:

  原帖由 鹿奔奔 于 2014-10-31 16:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  
  但是在跑样品的时候就没有第二个负峰了？这是怎么回事呢？

  你的出峰位置在哪，有可能是你的样品峰把那个倒峰盖掉了

• redbutterfly (2014-10-31 16:37:38)

  你再连续进样几次看一看，第二个倒峰应该是气泡造成的

• 鹿奔奔 (2014-10-31 16:38:04)

  你的出峰位置在哪，有可能是你的样品峰把那个倒峰盖掉了...
  
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  我的样品峰保留时间在3.110，就是图上那个比较高的峰

• 鹿奔奔 (2014-10-31 16:38:20)

  你再连续进样几次看一看，第二个倒峰应该是气泡造成的
  
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  如果是气泡的话，不能一加标品就出负峰，而加样品就没有了呀，而且样品保留时间也在负峰之前

• yjf1026 (2014-10-31 16:38:40)

  QUOTE:

  原帖由 鹿奔奔 于 2014-10-31 16:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  你再连续进样几次看一看，第二个倒峰应该是气泡造成的
  
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  如果是气泡的话，不能一加标品就出负峰，而加样品就没有了呀，而且样品保留时间也在负峰 ...

  你有没有开参比波长？

• summerxx (2014-10-31 16:38:57)

  色谱峰面积与其浓度成正比例增加。

• wood533 (2014-10-31 16:39:23)

  如果第一个峰确定是溶剂峰，那你的待测峰出峰时间太快了，几乎紧跟着溶剂峰就出来了，最好把流动相比例调一调，使样品峰与溶剂峰之间有一段时间差，否则溶剂峰可能会对待测峰的测定有影响。也许你多进几针，后面的倒峰就没有了，因为你的标品有第二个倒峰，而供试品却没有，有可能是柱子没有平衡好。关于色谱峰面积与浓度的关系问题，应该是浓度增加，峰面积增加。只是如果不是在线性范围内，浓度的增加，而峰面积增加不一定成比例。如果你是照标准做，应该是两者成正比；如果是你自己做标准，那你就要做个线性，看看你现在的浓度是不是与峰面积成正比。

• bgf5 (2014-10-31 16:39:41)

  你把样品冻干一下，用流动相溶解，应该就好了

• lixi559 (2014-10-31 16:40:01)

  流动相组成跟你的溶剂最好保持一致，如果有差异的话，容易有倒峰出现，但有时候，机器就是会出现一段时间的鬼峰，无法解释

• xue258 (2014-10-31 16:40:21)

  你应该让你的主峰尽量往后靠一点，这样子才好分析，毕竟溶剂峰跟主峰太靠近了
  

• 9妖9 (2014-10-31 16:40:42)

  应该是你设定了参比了，把参比去掉就可以了。

• mamamiya (2014-10-31 16:40:57)

  我以前做液相也遇到这样的情况，但只是一个倒峰，我觉有两种可能，一是进样时气泡没有排干净，二是跟你的柱子有关系，把柱子超声一下