【求助】凝胶柱对样品的要求

最新回复

• dream2013 (2014-10-31 16:42:53)

  极性小，氯仿甲醇 1:1溶解，上样，如果偏大，纯甲醇凝胶，也可以试试乙醇或者甲醇水凝胶。速度调慢点，1.5m内径2cm的凝胶，可以试一下。

• vera+ (2014-10-31 16:43:20)

  不知道你指的什么凝胶柱，液相直接溶解进样，流动相不能用有机溶剂

• glass (2014-10-31 16:43:40)

  如果是葡聚糖你凝胶分离黄酮之类的，样品完全溶解，然后流动相用一定比例的甲醇水就可以了。

• baidukk (2014-10-31 16:45:30)

  1g样品应该可以，感觉只要你的样品溶于甲醇，或者是溶于氯仿：甲醇1:1.都可以上柱，当然上柱的流动相分别就为溶解的溶剂了，我的样品是黑色浸膏，也大胆去尝试了，反正能溶 最后就能够洗脱下来，不过上样前，最好过一下0.45微米微孔滤膜。凝胶除了细分，也是一种很好的除色素的填料

• hold住 (2014-10-31 16:46:02)

  样品完全溶解在上样是关键   就用洗脱剂溶解比较好    上样前离心一下或是过微孔滤膜都可以

• 1472583690 (2014-10-31 16:46:41)

  不知道你指的什么凝胶柱，液相直接溶解进样，流动相不能用有机溶剂
  
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  可以用有机溶剂啊，甲醇，氯仿，丙酮都可以，看你的样品在哪个里面溶解度好，还可以甲醇：氯仿 1：1，样品要溶解后过滤或离心一下，颜色深没关系

• ENA (2014-10-31 16:47:58)

  要是用sephadex LH-20的话，首先你可以试下你的样品在什么溶剂溶解的好，然后用滴管装个小柱子，看样品污染柱子吗？要是不污染就可用；污染的话，最好不要用。
  

• daod (2014-10-31 16:48:25)

  不知楼主用的是那种凝胶柱，我们常用的凝胶LH-20，流动相用的是甲醇，对于颜色的问题我们一般是用滤纸过滤下，然后上样，上样后观察样品开始洗脱时是否会吸附在凝胶上如若吸附就停止洗脱并将染色的凝胶倒出来，回收样品。希望能帮上楼主。

• dream2013 (2014-10-31 16:48:51)

  上样颜色不能太重，否则柱材料的再生比较麻烦。凝胶主要是分子筛原理，对于分离有一定分子量差异的化合物比较有效。

• qhyu (2014-10-31 16:49:10)

  我也是经验不足：分两种情况：
  极性小的，可以溶于氯仿：甲醇=1:1的，用这个溶样品，上样，用这个比例一直冲柱到样品下来；
  极性大的，可溶于甲醇，用少量甲醇溶样，上样，然后从10%甲醇一直冲到纯甲醇，将样品分离下来！
  

• linlinstar (2014-10-31 16:49:46)

  上样颜色不能太重，否则柱材料的再生比较麻烦。凝胶主要是分子筛原理，对于分离有一定分子量差异的化合物比较有效。
  
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  不是说只要溶了 ，过滤下就可以了吗？
  还是只要上柱之后能冲下来就行啦？？

• linlinstar (2014-10-31 16:50:07)

  我也是经验不足：分两种情况：
  极性小的，可以溶于氯仿：甲醇=1:1的，用这个溶样品，上样，用这个比例一直冲柱到样品下来；
  极性大的，可溶于甲醇，用少量甲醇溶样，上样，然后从10%甲醇一直冲到纯甲醇，将样品分 ...
  
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  有些极性小的 ，要加石油醚才能溶啊。那我怎么办？？

• dream2013 (2014-10-31 16:50:21)

  同意楼上各位的看法，极性小的能溶于氯仿甲醇1:1，用这个溶剂溶了样品，并用它一直冲柱子，上样样品不宜太浓，极性大的用甲醇水等度或梯度冲，最好从一早上样，晚上基本就都走下来就好，石油醚部位极性太小，如果不能溶于氯仿甲醇，就不清楚了