【求助】改变什么条件才能使条带清晰

最新回复

• xevin (2015-4-01 17:38:36)

  
  有杂带，可以适当降低胶的厚度，新配电泳液，配胶的电泳液要和电泳槽里面的电泳液相同，增加胶的浓度，可以配2~2.5%的胶，保持电压稳定

• qianqin1977 (2015-4-01 17:38:59)

  应该是胶的问题，降低电压试试？？

• xyw5 (2015-4-01 17:39:14)

  
  DNA很杂吧，你看你的Marker跑的很漂亮

• xyw5 (2015-4-01 17:39:37)

  试想一下啊，我也不清楚，一起学习。你的Marker在大的bp的时候，条带还是比较清楚的，但是对于小的bp就开始模糊了，如果胶的浓度高的话，条带会压得更细，条带之间也会紧密一些，你加大浓度试一试。我跟你一起学习啊
  

• pulala (2015-4-01 17:40:13)

  胶放反了吧？

• SO2 (2015-4-01 17:40:28)

  
  我最近也出现这样的问题，感谢了

• BUK (2015-4-01 17:40:49)

  用的什么染料，推荐用EB，会比较清晰些，要sybr green的话，会模糊一些。

• dog002 (2015-4-01 17:41:12)

  
  估计是胶的问题吧

• 49888 (2015-4-01 17:41:29)

  
  电泳无外乎3个问题。第一，就是胶的问题，像拔梳子过早，缓冲液不对（用水做胶更糟糕），但是看你的电泳结果中maker非常好，说明胶本身是没问题；第二，就是PCR产物本身的问题，如退火温度不合适可能产生非特异性条带，产生弥散的条带，像你的电泳结果就有这样的现象，在目标条带上下都有弥散，所以你可以试着提高退火温度；第三，就是一些其他因素，例如你使用的loading buffer，染料等，例如楼上说EB的结果好一样。  我的感觉就是，你本身的PCR有一定的问题，建议调整一下，试一试。

• dior (2015-4-01 17:41:53)

  值得学习，我做的也存在这样的现象，提高退火温度试一下。

• S6044 (2015-4-01 17:42:11)

  
  是银染？还是？

• mimili_901 (2015-4-01 17:42:26)

  小分子的marker带也出现弥散，应该是缓冲液或胶的问题，可能是用水配的胶。不是PCR的问题。
  

• queen (2015-4-01 17:42:41)

  
  建议你用8%page胶跑上6个钟就会无比清晰