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杂菌总数的测定（一）
关键词：有证标准物质 食品农药残留检测 环保标准样品 进口标准物质杂菌总数的测定（一）
杂菌总数是指1 mL(1 g)样品中在一定条件培养后，所得的细菌菌落总数。杂菌总数的测定可以判定样品污染程度，同时可以观察细菌在样品中的繁殖动态，为被检样品进行正确的卫生学评价提供依据。
1．仪器
①l、5、10 mL吸量管。
②培养皿(平皿)。
③试管与锥形瓶。
仪器均需高压灭菌。
2．试剂
①0．9 %NaCl生理盐水。
②培养基的配制：蛋白胨l %，牛肉膏0．5％，氯化钠0．5％，琼脂2％，pH7．2～7．4，装入灭菌试管中约15 mL，高压灭菌后，保温45℃备用。
3．操作
①样品稀释及培养：在无菌操作条件下，用10 mL无菌吸管吸取样品10 mL。注入90mL无菌生理盐水中，充分摇匀，制成1：10的稀释液。
②用l mL灭菌吸管，吸取l：10稀释液1 mL，注人含有9 mL的无菌生理盐水的试管内，振摇试管，使其混合均匀，制成l：100的稀释液。
③取l mL无菌吸管，按上次操作顺序10倍递增稀释，每递增稀释一次，即换用1只1mL无菌吸管。配成1：1 000和1：l0 000的稀释液。
④分别吸取1：100、1：1 000、1：l0 000的稀释液各l mL注人平皿内，每个稀释度做2个平皿。
⑤立即将15 mL已冷却至45℃的培养基倾注入平皿内，并转动平皿使其混合均匀。
⑥另用1只不加检样，只倾注营养琼脂培养基的平皿作空白对照。
⑦待琼脂凝固后，用纸包好，翻转平皿，置于37℃恒温箱内培养24 h后取出，查出平皿内的菌落数并乘以稀释倍数，即得每毫升样品所含菌落总数。
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