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华东色谱质谱会学术报告荟萃

2010.11.08

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浙江大学化学系的朱岩教授,报告题目:高效液相-离子色谱柱切换方法分析反恐爆炸物残留组分

  来自浙江大学化学系的朱岩教授做了题为“高效液相-离子色谱柱切换方法分析反恐爆炸物残留组分”的报告。朱教授首先介绍了国际上从事反恐研究的意义,随着国际恐怖事件的不断升级和国内外形势的复杂化,各国军/警方都投入大量人力物理,建立了相应分析方法尤其是爆炸物残留的分析方法。但是爆炸物成分复杂,通常包含大量的有机物及无机物,因此需要建立一种快速、有效的方法来同时检测爆炸物残留中的有机成分及无机离子。根据美国环保局SW-846方法8330,有待分析的14种有机爆炸物主要包括硝基杂环烷、硝基苯类,无机爆炸物主要有硝基铵类、氯酸钾类爆炸物和黑火药,这些无机物离子均可以用离子色谱法分离检测。目前的反恐分析方法一般将有机成分及无机成分简单地用HPLC和离子色谱分别检测,耗时耗样,在样品含量特别少时比较困难。朱教授课题组建立了一种同时检测爆炸物中有机成分和无机离子的方法,应用高效液相色谱和离子色谱柱切换方法,40分钟内同时检测了14种有机爆炸物成分及5种无机阳离子,并获得良好的检出限、重现性和回收率。该方法主要由四步骤组成:(1)自动进样器将样品注入分析系统,在液相色谱流动相下,样品进入Acclaim Explosive E1柱,无机组分无保留,在死时间内即被冲出,有机组分得到分离;(2)无机组分冲出后,切换六通阀,由富集柱收集冲洗出的无机组分;(3)收集完全后再次切换六通阀,由离子色谱流动相冲洗富集柱,将收集到的无机离子带入离子色谱分析柱分析。

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复旦大学的张祥民教授,报告题目:功能化纳米材料研究与蛋白质选择性富集分离技术

  复旦大学的张祥民教授做了题为“功能化纳米材料研究与蛋白质选择性富集分离技术”的报告。张教授在报告中简要回顾了蛋白质组学研究的意义及复杂性,指出生物体内蛋白质种类繁多、性质复杂、数量庞大,而其中以磷酸化和糖基化修饰为代表的翻译后修饰研究,对现行的蛋白质组学研究方法和技术提出许多挑战。相对于普通材料,功能化纳米材料具有极大的比表面积和极高的表面活性。课题组针对翻译后修饰测定中蛋白质高效选择性富集方面的热点难点问题,将功能化材料与蛋白质分析结合起来,开展了一系列研究工作,发展了一些基于功能化材料的磷酸化和糖基化蛋白质组学研究新技术新方法。

  与IMAC相比,磁性纳米新材料具有更高的选择性,并且对低pH溶液、盐类、其它低分子污染物有更高的耐受性。课题组先后研究合成了TiO2、ZrO2、Ga2O3等金属氧化物包覆的磁球,并成功用于磷酸化肽段的富集。同时还合成了Fe3O4@C@Ta2O5和Fe3O4@C@SnO2磁球用于磷酸化肽段富集,展现了优越的富集选择性。课题组还研究了糖肽和糖蛋白的富集鉴定新方法。首先合成了纳米级金粒子,然后通过高温煅烧将这些纳米金颗粒烧结到MALDI-QIT-TOF-MS靶板上,再利用金和巯基之间的相互作用在这些纳米金颗粒表面修饰上巯基苯硼酸,用来选择性富集糖基化的肽或者蛋白质。进而发展了用“三明治”固定方法在硼酸纳米磁性微球表面固定了凝集素蛋白(Con A),并将其用于糖基化蛋白的分离富集。球表面直接固定Con A相比,利用上述”三明治“方法固定的Con A量提高了三倍。Con A纳米磁球、硼酸磁球和商品化的Con A磁球用来进行人肝癌细胞株7703细胞裂解液中糖蛋白的分离富集,获得了比商品化的Con A磁球更好的结果,具有制样简单、成本低、固定效率高、使用方面、亲和效率高等特点。课题组还发展了其它一些富集方法如:C60作为亲和配体的磁性低丰度富集方法,核-壳-壳结构磁性纳米材料高灵敏度检测蛋白质和肽方法,表面固定铜离子的介孔磁性硅胶微球及其选择性富集肽与高灵敏度质谱鉴定方法等。

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南京大学化学化工学院生命分析化学教育部重点实验室的刘震教授,报告题目:新颖硼亲和方法及其在组学分析中的应用

  来自南京大学化学化工学院生命分析化学教育部重点实验室的刘震教授做了题为“新颖硼亲和方法及其在组学分析中的应用”的报告,刘教授介绍了其课题组对硼亲和新材料和方法的设计思路,以及硼亲和材料在蛋白质组学和代谢组学分析中的应用。顺式二羟基生物分子,包括糖蛋白、糖肽、核苷、核苷酸、儿茶酚胺、糖类和DNA等,是一类特别的化合物,是目前蛋白质组学、代谢组学、糖组学和RNA研究等领域中的重要研究对象。对这些生物分子的选择性富集和高效分离具有重要意义。取代硼酸是一类独特的配基,能与顺式二羟基化合物在碱性条件下结合形成稳定的络合物,当介质的pH切换为酸性时,络合物解吸释放出顺式二羟基化合物。取代硼酸具有三个显著的优点:1)共价结合,亲和力强;2)可逆反应,结合/解吸过程容易控制;3)在酸性条件下解吸,解吸条件的质谱兼容性好。这些优点使得取代硼酸成为非常理想的亲和配基,特别适合于以质谱为核心的组学分析方法。刘教授课题组系统地研究了针对顺式二羟基生物分子的选择性富集和高效分离的新颖方法,发展出了一系列不同结构和性能的硼亲和整体毛细管柱、一系列不同结构和性能的硼亲和磁性纳米粒子、多种硼亲和固相微萃取探针和毛细管、以及相应的富集和分离方法。为了克服常规取代硼酸在中性pH下的亲和能力较弱的缺点,课题组原创性地提出了“团队硼亲和”的原理和两种相应的方法:开环聚合法和分子自组装方法。和常规的硼亲和性比较,团队硼亲和具有三大优点:一、一步反应,制备步骤非常简单;二、中性pH条件下亲和力大大增强;三、选择性更专一。团队硼亲和具有四个潜在的应用领域:1)蛋白质组学;2)代谢组学;3)糖组学;4)RNA研究。

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