【求助】SDS电泳样品中含有微量PEG，对电泳有多大影响？

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• zwsyrt (2014-4-18 15:34:03)

  
  这种PEG的影响应该可以忽略不计的，浓缩时用到的PEG都是未经活化的，仅仅起到吸水的作用，并不会与蛋白质发生反应，它与我们做蛋白修饰时常用的PEG不是一个概念，用于修饰的PEG的末端羟基都被取代（活化）成活性基团以后才会与蛋白的氨基、巯基等发生反应。楼主的蛋白并没有与PEG偶联，而且跑电泳时取样也很小，所以它对目的蛋白的电泳的影响可以忽略。即便是偶联上PEG的蛋白质也可以跑SDS-PAGE电泳，只是条带有些弥散、分子量有些偏差而已，但这也常作为PEG修饰后偶联度的一个测量方法，简单快速就是误差比较大。

• bamboo16 (2014-4-18 15:34:29)

  我昨天跑电泳了,效果很差,还很拖,不知道是不是PEG的原因,您帮我看看这张图吧

  
  43591049.snap.jpg

• gogo (2014-4-18 15:35:29)

  
  中间条带弥散，应该是PEG的影响，不知楼主混入了多少PEG，我们以前浓缩时即便有点PEG也不会影响这么严重的，建议楼主把样品上一次分子筛或透析，除去多余的PEG。

• bamboo16 (2014-4-18 15:35:52)

  我的PEG分子量2万，不知道到底有多少，是在用PEG浓缩的时候不小心混入的，透析可能不能出去吧，只能用分子筛试试了

• lxh031 (2014-4-18 15:36:11)

  
  那用PEG 浓缩后的样品可以用来跑2DE吗？会有多大影响？

• PINK (2014-4-18 15:36:34)

  
  PEG浓缩不好。
  量大用超滤膜包；量小用超滤离心管；
  效果没问题没问题的。