【求助】HPLC 和 质谱， 从质谱上看分子量

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• 大嘴猴 (2016-1-18 11:12:55)

  是的，现在多肽合成公司都是只提供HPLC和质谱报告的，这是现在合成多肽行业中的标准报告，核磁这一块基本很难保证。现在合成多肽技术主要是化学合成，会用到一些有机溶剂，合成期间肯定会会有一些盐分生成，而且每一批次的盐分生成量是比较难控制成一样的的，而多肽中的盐分是影响多肽氢谱结果的一个非常重要的因素，两次合成的多肽氢谱结果出现差异是有可能的。
        至于结构，多肽化学合成，都是从C端到N端一个一个接的，序列一般都是能保证正确的，所以纯度，质谱是保证定制多肽行业中最重要的检测标准的。
         个人建议，希望对你有所帮助。

• QQ爱 (2016-1-18 11:13:18)

  99%多肽一般MS对了，他这个产品也对了!因为合成过程是根据肯定序列一个一个接的！当然！这个是纯信用的！只会有极其个别的会出现多肽造假！如果要知道序列，那就测序！

• 跳跳哈里 (2016-1-18 11:14:06)

  你序列是否含有特殊的氨基酸，比如D型氨基酸，D型相比L型贵。

• wawa11 (2016-1-18 11:14:27)

  其中有一个 D型 氨基酸，  但是怎么检测这个氨基酸是D型还是L型呢

• 冰激凌 (2016-1-18 11:15:03)

  楼主，质谱相同不能说明问题，比如Ile 和Leu的分子量是一样，你根本分不清谁是谁。
  20肽用氢谱去表征，要解析起来难度不小啊，C13NMR应该更好一些吧！还有个直接的方法就是把两个样品1：1混合后走HPLC，看看是不是可以重合。如果完全能重合，基本就可以定下来。
  当然楼上说的序列分析绝对是好方法，但是似乎没有必要花大价钱去做。

• 大嘴猴 (2016-1-18 11:15:33)

  没有这两个氨基酸。
  碳更难把，浓度要求大，溶解度有限制。
  HPLC 这个办法好像不错。 那你也觉得核磁不同也可能是同一条多肽？

• 女儿情 (2016-1-18 11:17:17)

  个人认为碳谱会更好一些，就是要用的多肽量会要多好几倍，楼主可能会心疼。
  我们没有看到你的氢谱，也不知道两个东西打出来的核磁是不是完全不一样，还是混样进一针实惠方便。

• wawa11 (2016-1-18 11:17:43)

  两个氢谱其实差异只在3.5-4.0 ppm处， 有一个多了两组峰，并且强度挺大

• 今生如此 (2016-1-18 11:18:11)

  D型氨基酸贵很多啊，   估计有家公司 用L-型氨基酸代替D型的氨基酸了。

• 哈密瓜 (2016-1-18 11:18:36)

  DL的区别就旋光度不一样

• xiaoxiaoai (2016-1-18 11:19:07)

  这个应该不会，价格都谈好的，D型的加价了
  但是构型不一样，也不应该会有核磁上的差异呀

• 女儿情 (2016-1-18 11:19:31)

  D/L氨基酸 可以用HPLC 鉴定出来么？

• 跳跳哈里 (2016-1-18 11:20:01)

  排除溶剂峰了吗

• 大嘴猴 (2016-1-18 11:20:25)

  可能是质谱不一样，我们公司采用的是ESI-MS

• qinqinai (2016-1-18 11:21:07)

  楼主应该先了解下核磁适合测什么样的化合物，多肽又是什么样的化合物。不是所有的物质都是核磁能够测的，不要太本本主义

• 哈密瓜 (2016-1-18 11:21:36)

  一般公司提供HPLC和MS。如果客户要求其他的要求，核磁，氨基酸序列，maldi-toff或者一些都是要另外收费的。
  如果你需要其他报告，你可以要求，那价格就是两样了。我们公司H-NMR要收费100块，氨基酸组分测试400.

• 女儿情 (2016-1-18 11:22:04)

  当然会有差别，因为非对映异构体在核磁氢谱上理论上会有差别，不像对映异构体。