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FEBS发布CRISPR技术特刊

2016.9.12

  《FEBS Journal》杂志近日发布了一份介绍如何使用CRISPR/Cas9的特刊,它包含9篇综述文章,由知名研究人员撰写,包括哈佛大学的George Church和Norbert Perrimon,西班牙阿利坎特大学的Francisco Mojica,以及Sloan Kettering纪念癌症中心的Ralph Garippa。

  这份特刊覆盖了CRISPR的发现、CRISPR筛选、表观遗传编辑、模式生物和疾病模型中的CRISPR、向导RNA(gRNA)设计、脱靶效应,以及在治疗应用中与RNAi的比较。

  “我们希望这些综述就像它们介绍的技术一样将是有用的,立足于科学事实,并为探索提供指导,”Broad研究院遗传扰动平台的主管John Doench在文中写道。

  如今,科学界对CRISPR技术的热情日益高涨。论文的数量在呈指数增长。然而,许多研究人员仍在苦苦挣 扎,不能很好地使用它。“即使是十分成熟的工具,如限制性内切酶、抗体和Sanger测序,日常应用中仍时有失败,需要进行故障排查,”Doench写 道。“每篇综述头脑冷静地评估了如何最好地应用这项技术、它的优势以及它的局限性。”

  CRISPR最早是在细菌中发现的,作为细菌的适应性免疫系统。20多年前,Francisco Mojica发现了细菌中的CRISPR结构。这一次,他与米格尔•埃尔南德斯大学的Francisco Rodriguez-Valera一起介绍了这项技术的一些背景。

  CRISPR/Cas9系统也作为一种新颖的筛选方法,来鉴定生物过程中的重要蛋白。Sloan Kettering纪念癌症中心的Ralph Garippa和John Poirier以及约翰•霍普金斯大学的Linde Miles为这一应用提出了一些建议。

  George Church以及他实验室的一些成员讨论了CRISPR革命的下一站:RNA指导的表观遗传调控。最近,Cas9蛋白与效应物的融合,如转录激活子、抑制 子和组蛋白修饰物,实现了可编程的转录和表观遗传调控。这篇综述讨论了基因调控的CRISPR工具,以及使用这些工具的最佳做法。

  还有几篇综述主要介绍了CRISPR在疾病建模和模式生物中的应用。Sloan Kettering纪念癌症中心的Geulah Livshits及其同事介绍了利用CRISPR来研究体内的基因功能,重点在小鼠的疾病建模;西北大学的Erik Andersen和Mostafa Zamanian介绍了CRISPR在线虫中的应用,以研究热带疾病;宾夕法尼亚大学的Kiran Musunuru和Jennie Lin则介绍了利用CRISPR建立疾病模型时的注意事项。

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