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【求助】荧光定量阴性对照有阳性结果求助

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-10-26 22:58    作者: vtongli    来源: 分析测试百科网

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【求助】荧光定量阴性对照有阳性结果求助
今天做荧光定量， 是sybr green 染料法的， 在阴性对照里用的是不加模板的其他各成分混合物， 但是CT值27处有起跳。
使用的引物为细菌的通用引物 ，试剂用的是ABI公司的 。跑琼脂糖电泳在60多bp处有条带，我的pcr产物的长度也在60多bp左右。
想请教各位高手，有没有什么办法能够处理这种情况，不胜感激！
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最新回复

  • 了了 (2014-10-26 22:58:39)


    可能被污染了！
    pcr就怕污染

  • eric930 (2014-10-26 22:59:02)


    定量试验（包括配置引物）的枪最好专用，另外加样的地方离电泳和质粒抽提的地方尽量隔开，这2个实验用过的枪都不要用于定量试验

  • jingling845 (2014-10-26 22:59:15)


    检查是否实验的水被污染了

  • nikun230 (2014-10-26 22:59:41)

    我也遇见污染了，感觉不像是组分的污染。

  • qqshepherd (2014-10-26 23:00:10)

    我现在做的也遇到这种情况 ，分离加样区，超纯灭菌水，专枪专用这些方法都用了 ，好像不太管用  有高手知道原因的能不能告诉我一下

  • yyaxw84 (2014-10-26 23:00:32)


    我也正在做，碰到相同情况，不知道会不会是引物问题？
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