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NanoLuc™萤光素酶技术

2012.12.06
        NanoLuc™萤光素酶是Promega公司推出一种新型的萤光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171个氨基酸),发光更亮,比任何现有的生物发光酶用途更加广泛的特点,它是目前性能最好的生物发光报告基因之一。NanoLuc™萤光素酶的这些属性为报告基因检测提供了新的功能,在需要更高灵敏度的复杂生物学应用中深具潜力。

        NanoLuc技术包含一种新型底物――furimazine和一种独特的酶(NanoLuc™萤光素酶),前者由Promega公司有机化学家开发,后者由Promega公司的研究科学家利用定向进化技术开发。它具有无可比拟的小巧体积,可以用于增强的病毒传递和蛋白融合,而且它很容易从细胞中分泌。NanoLuc™萤光素酶比萤火虫(Photinus pyralis)或海肾(Renilla reniformis)萤光素酶的发光高两个数量级,在难转染的细胞中也能获得更好表现。此外,NanoLuc可应用在更多生理相关模型中,包括复杂的生物样品。NanoLuc萤光素酶简单易用――仅需加样-检测,且信号稳定,可以不经任何改良,实现从实验台操作到高通量筛选的规模放大应用。

       为满足在“下一代”遗传报告基因中的多种应用需求,我们提供12个版本的 NanoLuc萤光素酶质粒。产品包括NanoLuc-PEST(NlucP),它将蛋白表达水平变化与转录活性改变密切偶联,并增加信噪比。对于分泌型报告基因,我们通过融合N-末端分泌信号(secNluc)来制备NanoLuc萤光素酶载体。使用Nano-Glo™萤光素酶检测试剂,发光量在跨越1,000,000倍的浓度范围内呈线性关系,且信号半衰期≥2小时。

banquan12.jpeg

       手机拍摄的NanoLuc™萤光素酶发光信号。(注:96-孔板中, 转染了NanoLuc™萤光素酶载体的HEK293细胞,50000细胞/孔)

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