推进LC-MS/MS技术临床应用 提高临床检验技能水平

2017-4-19 23:00 来源: 分析测试百科
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——复旦大学附属中山医院液相色谱-质谱技术临床应用培训班举办

  分析测试百科网讯 2017年4月19日,由复旦大学附属中山医院检验科主办、复旦大学生物科学研究院协办的“液相色谱-质谱技术临床应用培训班”在复旦大学附属中山医院独山厅成功举办。本次活动围绕LC-MS/MS技术在我国临床检验领域的应用,邀请了国内外著名专家教授,向学员们讲授了液相色谱-质谱检测技术的基本理论、平台建设、开发验证与质量管理、临床应用和研究应用进展等方面的知识,共吸引约120名来自国内各大医院的检验人员、相关单位的工作人员参加。

液相色谱-质谱技术临床应用培训班

  上午,复旦大学附属中山医院检验科主任潘柏申教授出席并致欢迎辞,复旦大学附属中山医院检验科副主任郭玮教授主持,来自复旦大学生物医学研究院常务副院长杨芃原教授、复旦大学化学系丁传凡教授、克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监王思合教授共同带来以“液相色谱-质谱检测技术的基本理论”为主题的培训内容。

复旦大学附属中山医院检验科主任 潘柏申

复旦大学附属中山医院检验科副主任 郭玮

  复旦大学生物医学研究院常务副院长杨芃原为学员们带来了题为《临床质谱时代的到来--精准蛋白质组和精准分子标志物》 的精彩报告。

复旦大学生物医学研究院常务副院长 杨芃原

  质谱技术是分析化学革命性发展的驱动力。在过去的一百年中,先后有六位质谱学家获得了诺贝尔奖,他们的工作极大地推动了仪器制造学和分析化学的发展。其中ESI和 MALDI电离方式的发明奠定了今天蛋白质组分析的技术基础。

  报告指出过去常用的医学检测方法如凝胶电泳成像、ELISA等基于光学的检测手段成本低廉,但变异系数大、灵敏度有待提高。而新型的基于质谱法的检测技术具有更好的精确度和灵敏度,目前该技术已经在国内外推广的项目包括产前筛查(唐氏)、新生儿筛查等小分子的检测技术,蛋白、多肽和核苷酸的指纹图谱检测技术,以及基于抗体富集-信号基团放大的蛋白、抗原检测技术。

  复旦大学化学系教授丁传凡为学员们带来了题为《LC-MS/MS的基本原理与结构》的精彩报告。

复旦大学化学系教授 丁传凡

  报告介绍了LC-MS/MS 的基本原理和质谱仪器的结构与原理。LC由流动相和固定相组成,是溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。

  报告指出,GC-MS是适宜分析小分子、热稳定性好、能气化的化合物。一般用电子轰击方法(EI)电离产生样品离子,可与标准谱库对比。LC-MS主要用于难挥发性化合物,极性化合物,热不稳定化合物的分析测定,特别是大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析测定。

  质谱仪器中有几种用于串级质谱分析的质谱仪器,包括三重四级质谱,四极-飞行时间质谱,FT-ICR MS和Orbitrap MS。其中,FT-ICR MS是利用不同质荷比的离子在一稳定磁场中的回旋运动所产生的与质荷比对应的映像电流推断其离子种类。

克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监 王思合

  克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监王思合为学员们带来了题为《临床质谱检测的人员与设备要求》的精彩报告。

  王思合介绍了美国临床实验室改进修正案(CLIA),该条例对以诊断、预防或疾病治疗、健康评估为目的的人血、体液及组织样品实验室检测确立相应质量标准。现行CLIA’88条例于1992年首次公布,1994年开始实行,并于1993年、1995年、2003年先后经修订。美国医疗保险和医疗补助服务中心(CMS)签发了“标准和认证:实验室要求”以实施国会通过的CLIA法规。

  报告介绍了条例中要求的临床实验室中实验室主任、技术主管、临床顾问、行政主管、检测人员、技术人员的资格与职责以及对设备的要求。CLIA’88条例主要管辖对人员有特殊要求的临床实验室,临床质谱实验室中的工作人员需经过特殊教育及培训,满足质谱设备所需的特殊要求以确保检测质量及员工安全。

  下午以“液相色谱-质谱检测技术的平台建设”为主题的培训内容中,中国科学院生物物理研究所研究员李岩、美国宾夕法尼亚州立大学Milton S. Hershey医学中心病理核心参考实验室副主任朱玉胜、复旦大学生物医学研究院生物质谱分析高级工程师晏国全、克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监王思合分别带来精彩报告。

中国科学院生物物理研究所研究员 李岩

  中国科学院生物物理研究所研究员李岩为学员们带来了题为《如何选择LC-MS/MS仪器》的精彩报告。

  报告介绍了质谱的基本结构,包括进样系统、生物检测常用电离源模式、质量分析器(飞行时间分析器/四级杆质量分析器/Orbitrap分析器/离子阱分析器)、检测器、计算机数据处理系统,其中质量分析器是质谱的核心元件之一,决定了仪器的性能。质谱仪的选择要以实验目的为原则,报告介绍了蛋白质定性检测的仪器选择,蛋白质定量检测的仪器选择,代谢产物定性检测的仪器选择,代谢产物定量检测的仪器选择。

美国宾夕法尼亚州立大学Milton S. Hershey医学中心病理核心参考实验室副主任 朱玉胜

  教授为学员们带来了题为《液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)基本操作》的精彩报告。

  报告介绍了标本制备,标本检测(校准、内标、计算、质控)和结果报告。标本制备与萃取是尽可能多地消除干扰,同时最大化地回收分析物。常规的萃取技术包括稀释进样、蛋白沉淀、液液萃取(LLE)、固相萃取(SPE)。稀释进样常用于尿液、唾液与脑脊液;蛋白沉淀多用于相对高丰度蛋白样品的萃取以进行LC-MS定量检测;液液萃取是基于同一物质在两种互不相容的溶剂中具有不同的溶解度;固相萃取采用固相吸附剂(常包含于萃取柱内)于检测前纯化或浓缩样品成分。

复旦大学生物医学研究院生物质谱分析高级工程师 晏国全

  复旦大学生物医学研究院生物质谱分析高级工程师晏国全为学员们带来了题为《LC-MS/MS常见故障的原因分析与处理》的精彩报告。晏国全在报告中通过实际案例分析更直观地表述在实际操作中遇到的故障及原因分析。

  LC-MS/MS的常见故障包括液相色谱中的硬件故障/色谱柱问题/连接管路等,离子源的喷雾稳定性/硬件故障,质谱系统中的硬件故障/谱图污染峰/灵敏度等。例如,液相色谱的压力太高可能是由于色谱柱入口塞子污染、排液阀塞子污染、色谱柱污染、毛细管堵塞特别是进样针底座毛细管、进样阀转子堵塞、进样针或针底座堵塞等。

  克利夫兰医疗中心临床生化主任及医学总监王思合在下午的培训中带来《LC-MS/MS在临床小分子定量检测中的应用》的精彩报告。报告解释了LC-MS/MS用于患者标本小分子定量检测的优势与挑战,介绍LC-MS/MS能为患者诊疗带来的独特贡献,并阐述确立患者诊疗护理LC-MS/MS定量方法的原则。

  LC-MS/MS具有高特异性、高灵敏度、适用范围广、方法灵活、具有信息丰富的检测结果,可用于新生儿筛查、先天性代谢缺陷、毒理学与药物滥用、疼痛管理药物的检测、治疗药物监测、内分泌激素和蛋白质鉴定及定量。LC-MS/MS也面临着仪器复杂难以精通、自荐检测方法的缺乏、通量受限等挑战。

  会议间隙,液相色谱-质谱技术临床应用培训班演讲嘉宾与参会学员举行了合影。

液相色谱-质谱技术临床应用培训班合影

  本次液相色谱-质谱技术临床应用培训班的举办还受到了多家临床检测与仪器厂商的全力支持与倾情赞助,以下是部分参展企业。

沃特世

SCIEX

Thermo Fisher

华大基因

迪安诊断

PEAK

金域检测

ClinMeta

热耳科技