【求助】培养瓶中培养基总量的问题

字体: 小中大 | 打印发表于: 2015-2-25 17:37 作者: vera+ 来源: 分析测试百科网

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【求助】培养瓶中培养基总量的问题

如图，类似下面的这种规格的培养瓶，说的是面积是25平方厘米。问一下如果是消化法培养细胞，大致往培养瓶里面加多少液体，大概多少毫升。

我培养的是脂肪细胞

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sistis (2015-2-25 17:39:58)

这是T-25的瓶子。一般最少要加5ML培养基，最多不超过10 ML。
nn255 (2015-2-25 17:44:22)

我们一般是加5-6ml
##蒙奇奇 (2015-2-25 17:44:44)

我们平时加培养液为5-7ml，最多不超过10ml，不知道你是用胰酶消化还是用什么移液管消化细胞。
ritou1985 (2015-2-25 17:45:14)

看conrning康宁公司的说明书就知道应该加多少了！
vera+ (2015-2-25 17:45:49)

QUOTE:
原帖由 ##蒙奇奇 于 2015-2-25 17:44 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
我们平时加培养液为5-7ml，最多不超过10ml，不知道你是用胰酶消化还是用什么移液管消化细胞。
用的是胶原酶，在离心管里面消化组织
vera+ (2015-2-25 17:46:28)

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原帖由 ritou1985 于 2015-2-25 17:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
看conrning康宁公司的说明书就知道应该加多少了！
说明书倒是没找着。袋子上一串英文说的也大致是产品介绍，并没有说需要加入的量是多少
uaubc (2015-2-25 17:46:47)

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原帖由 ##蒙奇奇 于 2015-2-25 17:44 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
我们平时加培养液为5-7ml，最多不超过10ml，不知道你是用胰酶消化还是用什么移液管消化细胞。
我们也是这样的，把瓶底盖过来就好了
##蒙奇奇 (2015-2-25 17:48:42)

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原帖由 vera+ 于 2015-2-25 17:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

用的是胶原酶，在离心管里面消化组织
你养的是贴壁细胞吧！在离心管里面里面怎么消化啊！我不是很理解，谢谢回答
vera+ (2015-2-25 17:49:06)

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原帖由 ##蒙奇奇 于 2015-2-25 17:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

你养的是贴壁细胞吧！在离心管里面里面怎么消化啊！我不是很理解，谢谢回答
呃，实验书是说的。第一次做，求指点。。实验室没有老师，没有师兄师姐，也没有同学，完全是我自己弄。请多多指点迷津。。。。。。。。。
##蒙奇奇 (2015-2-25 17:49:28)

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原帖由 vera+ 于 2015-2-25 17:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

呃，实验书是说的。第一次做，求指点。。实验室没有老师，没有师兄师姐，也没有同学，完全是我自己弄。请多多指点迷津。。。。。。。。。
如果培养的是贴壁细胞，用胰酶消化之后，个人觉得没有必要在收集在离心管消化，结果都是一样的，将细胞消化下来
vera+ (2015-2-25 17:50:00)

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原帖由 ##蒙奇奇 于 2015-2-25 17:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

如果培养的是贴壁细胞，用胰酶消化之后，个人觉得没有必要在收集在离心管消化，结果都是一样的，将细胞消化下来

是用的胶原酶消化脂肪细胞，之后还要计数接种。应该在哪里面消化呢
qhyu (2015-2-25 17:50:56)

呵呵，是没有仔细看呀。一般要求贴壁细胞，每平方厘米放0.2-0.3毫升培养基，25平方厘米应该放5-8毫升。悬浮细胞可以多加些。
greenbee (2015-2-25 17:51:18)

不能太少也不能太多为原则吧，就是不能平放的时候让培养基溢出，也不能没不过细胞。
vera+ (2015-2-25 17:51:34)

QUOTE:
原帖由 greenbee 于 2015-2-25 17:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

不能太少也不能太多为原则吧，就是不能平放的时候让培养基溢出，也不能没不过细胞。
谢谢指点，做的时候会注意