【求助】我做纳米粒子的细胞切片TEM

最新回复

• 钻石 (2016-2-07 15:58:42)

  用PBS离心，洗几次就好了！

• 小熊妮妮 (2016-2-07 15:59:12)

  有些颗粒吸附在细胞表面貌似光洗洗不掉

• 886爱 (2016-2-07 15:59:55)

  对于TEM切片不了解，想请教一下，什么时候需要切片，对于检测样品有什么好处。
  问的好像很白痴，请指教

• 小熊妮妮 (2016-2-07 16:00:18)

  很多样品都比较厚，而TEM的电压即使到了200 kV，也只能穿透200 nm，所以一般的样品都要想办法弄薄。
  一般的无机粉末就用研磨法，方便易行。但也有一些样品比如纳米线，通常是躺着的，但你就想看端部的样子和结构，那么只好包埋切片。这样切片就起到固定样品到某一个方向，而后对某一方向减薄的作用。还有核壳结构，如果单单从衬度上看有时候不是很确定，但如果中间剖开，一切都真相大白，分析元素组成还不互相干扰。
  很多生物样品也是这样，但切片之前需要做很多处理工作，比如脱水，固定，染色等等（不一定都这么处理）。也有超薄切片，冷冻切片，都是为了看清楚一个组织的内部结构细节，而想办法减薄样品。
  只是就个人了解给你一些信息，供您参考。

• yayayu (2016-2-07 16:00:44)

  TEM 切片一般要小于70nm厚度，包埋切片一般用环氧包埋， 就知道这么多了。

• 大大 (2016-2-07 16:01:06)

  TEM的切片厚度好像要在200nm以下，50nm 最好，切片的量一般都很少就够了。材料还要看是否需要冷冻切片及其使用玻璃刀还是金刚刀。
  还要看你的样品软硬度怎么样，要是软的话可以用液氮冷却，另外就是将你的样品剪个三角形状放在环氧树脂中固化，然后再切。一般做TEM要求样品的厚度在100nm左右，更薄当然更好，这个老师会告诉你的。其实制样需要多做几次才能熟练，开始挺难的，特别是切那固化的样品。刀最好用带钻石的，这比玻璃刀切的样表面光滑，厚度均一。