生物物理所Cell Res揭示疾病蛋白在DNA损伤修复中的作用机理

2013-9-09 16:05 来源: 生物通
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  2013年9月3日,《Cell Research》杂志在线发表了题为“Structure analysis of FAAP24 reveals single-stranded DNA-binding activity and domain functions in DNA damage response”的论文,报道了FAAP24(Fanconi anemia associated protein 24KD)的三维结构,通过结构分析对其在DNA损伤修复中ssDNA结合活性以及结构域功能进行了体内体外的实验验证。

  这项研究由中科院生物物理所龚为民课题组、合肥强磁场中心田长麟课题组以及美国MD安德森癌症中心Lei Li课题组合作完成。

  范可尼贫血(Fanconi anemia ,FA)是由基因变异引发的常染色体隐形遗传病,FA 基因突变会导致骨髓障碍,癌症,早衰等一系列疾病。目前已经找到了与范科尼贫血相关的15个基因,其中FANCM–FAAP24异二聚体复合物能够感知 DNA损伤,募集通路中其它成员至损伤DNA处启动下游的修复工作。

  这项研究在通过NMR手段解析了FAAP24溶液结构,结合序列分析和结构比对,找到了参与ssDNA结合的关键氨基酸残基G168, G170, K171 and K173,设计了一系列突变体通过体外SPR,NMR滴定实验对此进行验证,并通过体内实验进一步确定与染色质结合的氨基酸位点的正确性。通过截短体实验确定FAAP24-(HhH)2结构域对ssDNA以及FANCM的结合的关键性作用。

  该研究揭示了FAAP24在DNA损伤修复中的双重功能,进一步阐明了FA蛋白参与DNA损伤修复的分子机制。