【求助】求问CHO细胞复苏方法～

字体: 小中大 | 打印发表于: 2015-2-25 17:52 作者: bongte 来源: 分析测试百科网

最近急用CHO细胞，可是之前实验室保种的一直无法复苏起来。
复苏过程是先把冻存的细胞37度解冻，然后添加50%培养基以稀释DMSO，之后1000rpm离心2min，弃上清；沉淀用培养基稀释后培养，可是第二天细胞一直悬浮着～～T T
使用的培养基已是高糖DMEM加20%胎牛血清、1%双抗。
另外还试过先离心然后去上清，重悬沉淀的方法，也不奏效。求大神支招啊。。。。

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【求助】求问CHO细胞复苏方法～

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最新回复

zhenxin (2015-2-25 17:53:10)

这样看来是因为你们实验室保存的CHO细胞已经老化或死掉了。最简单的方法是从公司重新购置新的CHO细胞或从别的实验室获得新的CHO细胞。
koook5695 (2015-2-25 17:54:17)

可以多加点培养基稀释DMSO试试，CHO应该很好养的
bongte (2015-2-25 17:54:36)

QUOTE:
原帖由 koook5695 于 2015-2-25 17:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

可以多加点培养基稀释DMSO试试，CHO应该很好养的
同一批保种的有复苏过，那时候做完实验没用就扔了，谁想现在突然悲剧了。。。
bongte (2015-2-25 17:54:54)

QUOTE:
原帖由 zhenxin 于 2015-2-25 17:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

这样看来是因为你们实验室保存的CHO细胞已经老化或死掉了。最简单的方法是从公司重新购置新的CHO细胞或从别的实验室获得新的CHO细胞。
我也这么怀疑，但是保种的还有一些，感觉不太死心呀。。。我们细胞是保在-80度的，这样的条件一般能保藏多久?
abc816 (2015-2-25 17:55:17)

CHO细胞长期保存应该是在液氮里面，-80度只适合短期保存（小于一个月）。建议买新细胞吧。时间花在这上面太不值了。
bongte (2015-2-25 17:55:32)

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原帖由 abc816 于 2015-2-25 17:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

CHO细胞长期保存应该是在液氮里面，-80度只适合短期保存（小于一个月）。建议买新细胞吧。时间花在这上面太不值了。
那能推荐购买对象或方法吗？谢谢啦，昨天复苏一管又没活，我也不想再这样弄了
DNA (2015-2-25 17:55:57)

对不起，我不太熟悉国内的公司（国内公司可能会便宜些），但相信应该有许多国外的代理公司在国内有销售点，你可以谷歌或百度一下。祝好运！
yayya (2015-2-25 17:56:15)

我最近也想购买我打算在上海生物试剂购买