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【求助】我看下我的蛋白电泳条带

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-3-27 22:44    作者: mnstyle    来源: 分析测试百科网

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【求助】我看下我的蛋白电泳条带
目的片段711bp，预测目的片段大小为46kd左右，PET32a空质粒子大小为21kd左右，测序已完成。
1.  蛋白Marker：
2.  PET32a空质粒诱导表达
3.  全菌诱导表达（1ml菌离心加了100ul的PBS和100ul的上样缓冲液）
4.  未诱导阴性对照
5.  包涵体存在形式
6.  上清
我一个同学说我这个没有表达，还是菌体蛋白，请论坛的人帮我看看
还有我的表达量不是高，如何解决（我的诱导温度30度，4h）
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最新回复

  • mnstyle (2014-3-27 22:44:31)


    有表达，不过是包含体，上清中没有，如果想在上清中表达，还可以降低温度，改变IPTG浓度等方法试试，如果不行就直接换载体了。

  • mamamiya (2014-3-27 22:46:08)


    图跑的不是很好
    包涵体中有条多出来的带，但是似乎比全细胞中的量还要大。请问您上样的蛋白浓度是否一样啊？

  • mnstyle (2014-3-27 22:46:27)


    上样量是一样的，但是浓度估计不一样

  • IAM007 (2014-3-27 22:46:44)


    我觉得是有表达的 在表达的在44KDa左右
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