【求助】菌液PCR跑成这样了

最新回复

• jude (2015-3-11 16:54:34)

  
  你的maker都没跑好，建议你降低电流重新跑一遍，适当增加胶的浓度

• sistis (2015-3-11 16:54:48)

  这有什么好分析的，根本没跑开嘛

• memory (2015-3-11 16:57:22)

  
  Marker跑的效果不好  目的带就更不好判断了  

• remenb (2015-3-11 16:58:25)

  
  适当提高退火温度，适当减少循环次数，具体的可以单聊
  

• 33号 (2015-3-11 16:58:42)

  
  胶不给力啊做的

• 2541 (2015-3-11 16:58:59)

  太心急了，带还没跑开

• october7 (2015-3-11 16:59:22)

  QUOTE:

  原帖由 2541 于 2015-3-11 16:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  太心急了，带还没跑开

  但是胶已经拖尾了

• october7 (2015-3-11 16:59:44)

  QUOTE:

  原帖由 remenb 于 2015-3-11 16:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  适当提高退火温度，适当减少循环次数，具体的可以单聊
  

  试过了，退火温度已经有55℃升高到57℃了，毫无反应。同样拖尾
  

• tewank (2015-3-11 17:00:53)

  marker没有跑开啊！是不是胶有问题啊！

• jingling845 (2015-3-11 17:01:30)

  试过了，退火温度已经有55℃升高到57℃了，毫无反应。同样拖尾
  
  ===========================================================
  
  退火55.5℃，三十个循环；胶用1%的，电泳110V，150mA，跑35分钟再试试

• 2541 (2015-3-11 17:01:50)

  拖尾了也可以继续跑 不要心急

• gemei0115 (2015-3-11 17:02:18)

  我感觉胶配的有问题，记着用电泳缓冲液配，看样子你的胶浓度应该小于1%

  
  捕获A.PNG

• memory (2015-3-11 17:02:42)

  你跑了5分钟吧 没跑开

• xue258 (2015-3-11 17:03:17)

  
  稀释一下pcr时模板的浓度

• zhenxin (2015-3-11 17:03:43)

  纸上谈兵可以从以下几点考虑1.引物2.退火温度3.胶的浓度4.电压5.循环次数6.其他 酶 离子浓度 缓冲液

• ero11 (2015-3-11 17:04:06)

  人才啊！~
  如果他们说的你都觉得没问题，会不会是电泳缓冲液浓度有问题，或者电泳仪坏了，或者人品有问题~~
  

• 1221 (2015-3-11 17:04:35)

  胶没跑开 提高退火温度 降低mg离子浓度

• xingyi08 (2015-3-11 17:04:50)

  胶多融一会啊

• 圆圆圈圈 (2015-3-11 17:05:16)

  胶很可能出问题了 建议重做一个 呵呵

• KGZ564 (2015-3-11 17:06:33)

  mark都没跑开，肯定与什么退火温度没关系了，你跑了几分钟？会不会是时间太短了，魏老师实验室的胶都是反复使用的，要么就是胶使用次数太多，要么就是你煮胶时时间太短，