沙门氏杆菌的检验

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沙门氏杆菌的检验
关键词:有证标准物质  食品农药残留检测  环保标准样品  进口标准物质
    沙门氏杆菌属裂殖菌纲,真细菌目,真细菌亚目,肠杆菌科沙门氏杆菌族沙门氏杆菌属。体摄人大量沙门氏杆菌族的活菌后,在肠道内繁殖,经淋巴系统进人血液循环,出现暂时性菌血症,引起全身感染。在小肠淋巴结和其他单核吞噬细菌被破坏后,沙门氏杆菌放出毒素,造成腹泻等食物中毒症状。沙门氏杆菌在60℃,加热10 min可以被杀死,病人、动物及带菌者,排泄物均可污染水、食物、蔬菜。
1.样品及接种
    食品中沙门氏杆菌的检验:按无菌手续称取样品15 g,溶于100 mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液中,于37℃恒温箱中培养20~24 h;将培养后的增菌液划线接种于普通琼脂平板上,选择培养基及鉴别培养基各一个平板(BS及HE)。经37℃,培养24 h观察并挑取可疑菌落接种于三糖铁斜面,应多挑几个菌落,以防遗漏。志贺氏菌落与沙门氏杆菌落相似,均为无色半透明、边缘整齐,但志贺氏菌落较小,透明且更为扁平;将可疑菌落接种于三糖铁斜面,于37℃培养18~24 h,取出观察,若底层葡萄糖产酸或产气,其色变黄,多数产生硫化氢变为黑棕色,上层斜面对乳糖不分解,保持红色,可疑为沙门氏杆菌。生化反应试验如果符合,便可作阳性结果报告。如为阴性,再培养24 h后,观察结果。
2.生化反应试验
    三糖铁培养基上的反应属可疑沙门氏菌者,则可进行一套简易生化试验。
    将一块洁净干燥的载物玻片,用接种环取诊断血清,滴加于玻片的一端,然后用接种环取培养物,细心地混匀于血清中,并以培养物混匀于另一端的生理食盐水内,在3 min内观察结果。如果是沙门氏菌培养物,则发生凝聚现象,而对照者应为均匀乳状,无凝集现象。
    试验中对可疑沙门氏菌用A_F群多价血清作玻片凝集试验,有凝集现象为阳性,并配合沙门氏菌典型生化反应菌株,用O因子血清确定所属群别,再用H因子血清分型。
    3.判定结果
    ①血清学鉴定与生化反应均符合即可报告为发现沙门氏菌属。
    ②血清学鉴定为阴性反应,但生化反应符合者,要做氰化钾或亚砷酸钠试验,如果符合,可报告为发现沙门氏菌。
    ③凡血清学鉴定与生化反应均不符合者,可报告未发现沙门氏菌属。
    ④生化反应不符合时,可以按下列不同情况报告。
    a.尿素、硝酸盐均不符合者,可报告未发现沙门氏菌属。
    b.乳糖、蔗糖、水杨酸、甘露醇、靛基质试验有两种或两种以上不符合者,可报告未发现沙门氏菌属。
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