【讨论帖】EB能否致癌？能？不能？你来说能不能？

最新回复

• standbyme (2015-7-01 22:38:51)

  
  EB替代物究竟是什么成分？

• 3648755 (2015-7-01 22:39:54)

  
  相关疾病：
  染色体障碍
  
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  edentry
  EB替代物究竟是什么成分？
  
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  GoldViewTM代替EB
  GoldViewTM 核酸染料——使用说明
  概 述
  GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而单链DNA呈红色荧光。GoldView不仅能染DNA，也可用于染RNA。
  通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验，致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂。因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
  使用方法
  1. 将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%～2%）在微波炉中融化。
  2. 加入5µl GoldView，轻轻摇匀，避免产生气泡。
  3. 冷却至不烫手时倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
  4. 电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录，则关闭相机的闪光灯，放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相，通过调节光圈、曝光时间，选择合适的滤光片，可得到成像清晰、背景较低的照片。
  注意事项
  1. 胶厚度不宜超过0.5cm，胶太厚会影响检测的灵敏度。
  2. 加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响，但不明显。
  3. 通过凝胶电泳回收DNA片段时，建议使用GoldView染色，在自然光下切割DNA条带，避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤，可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
  4. 虽然未发现GoldView有致癌作用，但对皮肤、眼睛会有一定的刺激，操作时应戴上手套。
  电泳结果显示GV灵敏度与EB相当

• jrwyyplt (2015-7-01 22:40:15)

  至于国内有公司宣称的新产品Goldview，我们不想多加评论。因为从极为相似的对比试验结果来看，该产品似乎就是AO（丫啶橙 ，一种剧毒产品，且荧光型号不佳））。
  详见cuturl('http://www.ope-tech.com/doc/GelRed.asp') 。我记得以前有人讨论过所谓的Goldview的好处，结果很多人明白后都大骂卖这东西的公司，把个丫啶橙换个名字卖给国人赚黑心钱哦。

• bring (2015-7-01 22:40:44)

  
  铁定致癌啊！当年分光室被一牛人弄了满地EB，从此我再也没进去。

• kuaizige (2015-7-01 22:41:07)

  
  Health hazard
  Ethidium bromide is a mutagen, suspected carcinogen and at high concentrations is irritating to the eyes, skin, mucous membranes and upper respiratory tract[citation needed]. The health effects of ethidium bromide exposure have not been thoroughly investigated. It is suspected to be carcinogenic and teratogenic because of its mutagenicity, although there is no direct evidence of either effect. The toxic effects of ethidium bromide may be experienced if swallowed, inhaled or absorbed through the skin. However, ethidium bromide is not easily absorbed through the skin because of positive charge and bulky structure.
  The National Toxicological Program has published data [1] (this was current as of 08/08/2007) and an Executive Summary [2]. Both the data sheet and the executive summary note that ethidium bromide (under the name homodium bromide) has "some reported use as an antiparasitic & antiprotazoic drug in animals; has also been used as a drug or drug precursor." In the section Evidence for Possible Carcinogenic Activity of the Executive Summary it is stated that: "several early '70s studies reported that EB demonstrated antitumorigenic effects." In the Report on Carcinogens (11th Edition)[3], ethidium bromide is not listed in the body of the report but is listed in Table 1 with the testing status noted as "No additional testing".
  Ethidium bromide is thought to act as a mutagen because it intercalates into double stranded DNA, thereby deforming the molecule. This is believed to block or trip biological processes occurring on DNA, like DNA replication and transcription.
  from cuturl('http://en.wikipedia.org/wiki/Ethidium_bromide')

• H2O (2015-7-01 22:41:24)

  本人也认为EB可以致癌，我在跑电泳时，也是非常小心，带着手套操作。我们还是小心一些，尽管科研需要献身精神，但我们还是要保护好自己啊！

• xueyouzhang (2015-7-01 22:41:46)

  
  相关疾病：
  锥虫病
  应该有潜在致癌的风险,应该没有急性毒性.
  在非洲至今仍有人使用EB肌肉注射治疗锥虫病,你说恐怖吗?所以很多时候是自已吓自已.

• bangqi_k (2015-7-01 22:42:05)

  
  怕死的人不适合做研究！仅此而已。

• 小葵 (2015-7-01 22:42:24)

  
  SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单：无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低。可适用于多种电泳分析。
  SYBR Green I 适合于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶电泳，脉冲电场凝胶电泳，和毛细管电泳等。
  SYBR Green I 与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。另外，SYBR Green I 与EB相比，诱变能力大大降低。
  SYBR Green I 核酸染料特点
  高灵敏：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
  　　信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
  　　操作简单：无须脱色或冲洗。
  　　适用范围广：可适用于多种电泳分析。
  　　使用方便：不影响其它修饰酶作用。
  　　经济：价格比银染便宜。
  电泳用SYBR Green I 使用方法
  SYBR Green I预染方法
  1. 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
  2. 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍，即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
  3. 制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
  4. 样品染色：向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
  5. DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。
  6. 上样、电泳：按常规操作。
  SYBR Green I后染方法
  1. 按照常规方法进行电泳。
  2. 用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液，混匀，制成染色溶液。
  3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
  4. 用蓝盾TM观测。蓝光可透过玻璃，观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝盾TM内观测。
  SYBR Green I使用注意事项
  1. 在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中，电泳时间不要超过2小时，否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。
  2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中，SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。
  3. 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行 Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。
  4. 在紫外照射透视下，与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
  5. SYBR Green 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

• 园丁## (2015-7-01 22:42:50)

  QUOTE:

  原帖由 kuaizige 于 2015-7-1 22:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  Health hazard
  Ethidium bromide is a mutagen, suspected carcinogen and at high concentrations is irritating to the eyes, skin, mucous membranes and upper respiratory tract[citation needed]. The health ...

  有关EB致癌的内容都来源于口口相传、网上介绍、或者是其他替代物的一些说明书。然而这些都有可能源于“众口铄金，积毁销骨”。所以本着对科学负责的态度，我们认为实验才是检验真理的唯一标准。在我们没有进行相关的实验之前，那么我们的结论只得依赖浩瀚的文献资源了。
  比如sosorunning战友引用的英文维基上的一段文字中提到：

• 园丁## (2015-7-01 22:43:05)

  而事实上，在一些用EB染色的实验当中，发现EB并不能进入活细胞的细胞核当中，因此因为“intercalates into double stranded DNA”而导致其致癌的设想并没有实验结果的支持。
  EB染色的相关文献：
  1. Critical evaluation of techniques to detect and measure cell death--study in a model of UV radiation of the leukaemic cell line HL60. Leite M, Quinta-Costa M, Leite PS, Guimarães JE. Anal Cell Pathol. 1999;19(3-4):139-51.
  2. Evaluation of Mn2+ stimulated and Zn2+ inhibited apoptosis in rat corpus luteal cells by flow cytometry and fluorochromes staining. Zhang JH, Yu J, Li WX, Cheng CP. 1: Chin J Physiol. 1998 Jun 30;41(2):121-6
  EB染色，大家也可以参阅我版老版主eeflying参与的讨论贴：
  AO/EB细胞凋亡
  eeflying版做的AO/EB染色正常细胞的图片：（EB染色为火焰色，AO即丫啶橙染色为绿色）
  
  所以这也是咱们为什么坚持征集EB及其相关替代物致癌的相关文献的原因。

• mingming0638 (2015-7-01 22:43:19)

  
  支持楼主说法
  各位战友应该给出证明EB能（或不能）致癌的科学根据，而“自我认为”是不可信的。
  我见过有戴两层手套操作的，有直接用手进行电泳操作的，就目前来看，两位身体健康。所以对EB能否真致癌，应该有科学实验证明，不能人云亦云。

• qumm1985 (2015-7-01 22:43:35)

  
  在不确定可不可以致癌时先保护好自己是肯定没错的。
  相信戴手套是没错的

• leifengta (2015-7-01 22:43:51)

  
  带手套吧，出了健康问题，吃亏的是自己。带个手套又不费多大事。健康才是第一位的，你病了，还不是害家里人担心。

• Ao7 (2015-7-01 22:44:07)

  
  大家有没有用过Gelview？这也是不久前听人推荐的EB替代物
  网上资料：
  Gelview是一种新型核酸染料，当用琼脂糖电泳检测DNA时，Gelview与核酸结合后能产生极强的荧光信号，其灵敏度比EB高，其使用方法与EB完全相同。由于溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂，对人体有很大危害，而Gelview经检验未发现有致癌作用，因此用其代替EB是一种很好的选择。在紫外透射光下，双链DNA呈现极其鲜明的绿色荧光。 使用方法： ◆ 将20ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化。 ◆ 待胶冷却至50-60℃时.加入2μl Gelview，轻轻摇匀，避免产生气泡。 ◆ 倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。 ◆ 电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录，则关闭相机的闪光灯，放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相，通过调节光圈、曝光时间，选择合适的滤光片，可得到成像清晰、背景较低的照片。 注意事项： ◆ 胶厚度不宜超过0.5cm，胶太厚会影响检测的灵敏度。 ◆ 加入Gelview的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响，但不明显。 ◆ 通过凝胶电泳回收DNA片段时，建议使用Gelview染色，在自然光下切割DNA条带，避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤，可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。 ◆ 电泳结果显示Gelview灵敏度比EB高。
  来源cuturl('http://www.188mb.com/User/baitaikang/NewsShow.asp?id=56263')
  不知道这个东西是否也跟glodview性质类似，请赐教

• eve_49 (2015-7-01 22:44:24)

  
  Ethidium bromide (sometimes abbreviated as "EtBr", the abbreviation also confusingly used for bromoethane) is an intercalating agent commonly used as a fluorescent tag (nucleic acid stain) in molecular biology laboratories for techniques such as agarose gel electrophoresis. When exposed to ultraviolet light, it will fluoresce with an orange color, intensifying almost 20-fold after binding to DNA. Under the name Homidium, it has been commonly used since the 1950s in veterinary to treat Trypanosomosis in cattle, a disease caused by trypanosomes[citation needed]. Ethidium bromide may be a strong mutagen. It is also widely assumed to be a carcinogen or teratogen although this has never been carefully tested。
  Huang Q, Fu WL (2005). "Comparative analysis of the DNA staining efficiencies of different fluorescent dyes in preparative agarose gel electrophoresis". Clin. Chem. Lab. Med. 43 Musical Note: 841–2. doi:10.1515/CCLM.2005.141. PMID 16201894.
  cuturl('http://www.safety.ed.ac.uk/resources/General/EthBrHandProt.shtm')

• ffooll (2015-7-01 22:44:42)

  
  我一直用手抓，哈哈哈，我不怕。吃东西才会致癌呢，看现在的多少劣质食品，就像核电站旁边人的暴露还比不上天天晒太阳暴露呢。

• ilovegaga (2015-7-01 22:45:09)

  
  肯定致癌啊，哥们，还是注意一点好。

• 101010 (2015-7-01 22:45:29)

  
  某公司一个介绍GelRed和GelGreen的网页上有一篇文章的链接，说是从实验上估算EB的毒性：
  Ouchi, R. Y., A. J. Manzato, et al. (2007). "Evaluation of the effects of a single exposure to ethidium bromide in Drosophila melanogaster (Diptera-Drosophilidae)." Bull Environ Contam Toxicol 78Devil: 489-93.
  还有来自美国纽约洲 Litron Laboratories 的原版毒性对比检测报告，链接如下：
  cuturl('http://www.ope-tech.com/product/product_info/Safety_Report/EB%20%5B054K3681%5D%20FinalReport%20')(1).pdf
  我暂时没时间细看，有兴趣的战友可以找来看一下。

• join (2015-7-01 22:45:47)

  
  我不知道有没有毒性作用,保险起见,我一直带手套