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【转帖】神奇的PCR
曾经对PCR一无所知;之后不知所云;再则豁然开朗,并为之痴迷...经过一番苦战,终于实现了17重扩增检测SNP!时而为之兴奋!【转帖】神奇的PCR
但是,每次一想到要提取DNA就后怕,一则捞财害命;再则真担心被感染上什么东东。其实倒没那么可怕:)于是就梦想要是能不通过提取就能进行PCR扩增该有多好啊!梦想在课题结束中沉睡。后来,又把命搭在了从组织提取RNA上,要说提取DNA是后怕,那提取RNA呢简直就叫惨绝人寰。不时在骂:***是谁提出要这样干的?!日子就在恶梦中残喘。
有一天,当我看到12年前的两篇NAR文献时,我首先骂的是老板:没那能力招什么研究生,不是误人子弟吗!回头想想,也怪自己查文献不认真。
当我们必需花费很多很多宝贵的时间按照前人建立的方法一步一步提取时,当我们必须花很多可望而不可及的金钱去购买试剂盒时,我们的同僚却早早就实现了用血和组织直接进行PCR扩增。
我真的不明白为什么有那么多人,愿意花那么多钱,耗费那么多人力(虽然是免费的)去干那么多无意义的事?很值得我们深思......
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最新回复
66+77 (2016-3-01 17:10:30)
dog002 (2016-3-01 17:10:52)
呵呵!当然不是用活的血细胞,所以不需要培养保存;而是采用干血或死组织,一则携带方便,二来嘛费用大大的减少!
No problem,I will send them to you.Good luck!
dog002 (2016-3-01 17:12:02)
These are some papers on PCR amplification from blood and tissue directly.I hope it will be helpful for you.
1.Panaccio M and Lew A.PCR based diagnosis in the presence of 8%(V/V) blood.Nucleic Acids Res,1991,19,1151.
2.Panaccio M,Georgesz M and Lew A.FoLT PCR:A simple PCR protocol for amplifying DNA directly from whole blood.Biotechniques,1993,14,238-243.
3.Michael Panaccio, Michael Georgesz, Catherine Hollywell and Andrew Lewl.Direct PCR from solid tissues without DNA extraction.4656 Nucleic Acids Research, 1993, Vol. 21, No. 19
831226 (2016-3-01 17:12:32)
dog002 (2016-3-01 17:12:51)
我认为没问题,我们已经实现了多重扩增法从全血直接检测SNP,由于文章还没发(BioTech),所以不便透露太多,请见谅!
dog002 (2016-3-01 17:17:58)
发此贴的目的也主要是为了引起大家对该领域的关注及重视,同时也希望能通过这样的方式来促进交流,少走弯路。自私一点说是能保证毕业,从宏观的角度说,也是想通过大家齐心协力提高我们国家的科学研究水平,发展科学事业。
“把自己的经验告诉别人,你将获得两倍以上的经验”
个人观点
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