质谱沙龙第三十期活动报道
血斑(DRIED BLOOD SPOT,DBS)LC-MS/MS分析进展
AB SCIEX公司市场研究部经理彭立新博士作了题为《血斑(DRTED BLOOD SPOT,DBS)LC-MS/MS分析的进展》的报告，介绍了DBS分析的基础知识、优缺点，以及DBS液质分析法在生物医药领域的应用实例。
AB SCIEX公司市场研究部经理 彭立新 博士
血斑分析在40年前就已经存在了，最早用于临床实验，不需要精确的定量分析，现在主要用于新生儿和一些免疫系统缺陷疾病的筛查。
DBS技术分析特点
DBS分析的优点：操作方便，样品体积小，降低样品运输和存储成本。更重要的是能在临床前期实验中减少动物用量，这是医药公司尤其看重的。另外，采血量少，病人更容易接受，特别适合儿科。样品不需冷冻，稳定性好。
DBS分析也存在局限性，由于样品容量小，需要检测技术灵敏度高;同时，手工操作，工作量大，这两点制约了DBS分析方法的发展。这就需要液相色谱、质谱来助航。
血斑的LC-MS/MS分析
液质联用的出现，提高了血斑分析的灵敏度，可进行定量分析，误差小于15%，使血斑分析越来越来越热门。
AB SCIEX QTRAP 5500 LC/MS/MS系统是目前世界上最高性能的高端液质联用串联质谱系列。5500本身就能满足DBS检测灵敏度的需要， QTRAP 5500 能进一步消除基质效应。与Turbo V™离子源和MultiQuant软件连用可进行批量分析。另外，API 500和三重四极杆5500也完全能满足DBS分析要求的ng/ml级灵敏度。
使用QTRAP5500系统和先进的MultiQuant分析软件，LC-MS/MS分析方法速度快、灵敏度高，在DBS分析领域迅速发展，在布德松和氟替卡松丙盐酸测量方面取得了很大进展。选择不同纸板，增加血片直径等方法，可以提高样品容量。随着色谱、质谱等仪器和DBS技术本身的不断发展，不仅只可以做血斑还可以用于类似体液类样品的定量分析。彭老师通过几个实例详细介绍了不同样品的定量分析，如使用5500 LC/MS/MS，采用DBS方法可以定量分析氟康唑，采用DMS方法可定量分析眼泪中的妥布拉霉素等。
最后，彭老师总结说：DBS技术的准确度和精度能够满足做生化分析的要求，另外它是现在生化样品分析工具的一个补充，最重要的是它可以节省很多样品制备的费用。据预测，DBS技术未来将占据25%～50%的市场份额，随着质谱技术和DBS接口的技术越来越成熟，将会有更大的发展前途。
“二分五性三码一谱”新策略探索解决体内药物分析中存在的或然问题
空军总医院药学部的梁贵健老师作了题为《“二分五性三码一谱”新策略探索解决体内药物分析中存在的或然问题》的报告，分别从提出的背景、内涵意义和作用、实例等方面介绍了“二分五性三码一谱”新策略在解决体内药物分析中存在的或然性方面的探索。
空军总医院药学部的 梁贵健 老师
药物色谱分析方法现状
色谱分离条件的优化是色谱分析应用中面临的主要问题，分子结构参数与其保留值的预测一直是色谱学家追求的目标。尽管国内外在上述领域做了大量工作，但面对结构复杂多样的药物，其应用结果却大多难以令人接受。
目前建立药物色谱分析方法仍处于反复摸索的偶然或然状态，或借助单纯形、窗口图法、重叠分辨率法和均匀设计等优化方法。与其紧密相关的基础性问题，至今未得到系统的研究。
在生物样品分析中，如何避开内源物、临床联合用药和代谢产物对被测物的干扰，对于选择良好的色谱条件、预处理条件和优化内标物至关重要。要解决这样的问题，必须全面掌握内源性物质和常用药物的色谱行为以及预处理后被除去、纯化和富集的数据和规律。目前在这一领域的研究多为“就药测药”的应用性研究，还没有一个基于实验数值型数据库或能对流动相组成、内标选择和样品预处理方法三者进行推荐和仿真模拟的专家系统。
“二分五性三码一谱”
“二分”从分析样品性质上区分是药品分析还是生物药物分析，从药物结构上分清被测药物的酸碱性。“五性”即色谱性、检测性(响应性)、稳定性、回收性和商品性。“三码”即色谱码、检测码和回收码。“一谱”即内源性干扰三维码。二分定原则，五行选药物，三码找方法，一谱除干扰。
以HPLC-PDA-MS为测试手段，通过统一规范操作和计算机信息技术，创建高具有可比性的百种药物的色谱码、检测码和人血样品预处理回收码及去内源性干扰三维谱数据库，开创在网络上进行在线或离线指导快速建立稳健的HPLC药物分析方法的先例，解决流动相、内标和预处理三项试验方法优化的或然性瓶颈问题。
几个重要问题
梁老师还就实验中遇到的几个重要问题与大家进行了交流。
首先是内标，通过测试发现了一些光谱吸收区域宽、色谱行为优良和稳定性好的药物，有望充当常用内标物。并且通过实验总结出了20多种内标选择规则。接下来从内标的加入程序、内标被测物的相容性、内标来源和方法等方面进一步阐述了建立可推广的内标选择方法。
其次简单介绍了pH值4-5双突跃现象、在测量pH值时如何尽量减少误差，以及关于回收率的问题。
最后，梁老师对“二分五性三码一谱”新策略目前取得的成果和存在的问题进行了总结。
