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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-12-04 15:02 作者: fox_79 来源: 分析测试百科网
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原帖由 fox_79 于 2014-12-4 15:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 冷冻管应如何解冻? 谢谢大虾们!
原帖由 idea2011 于 2014-12-4 15:05 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO?
原帖由 fox_79 于 2014-12-4 15:07 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 可否使用与原先培养条件不同之血清种类?
原帖由 dragonkilly 于 2014-12-4 15:08 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 想借这个帖子问下,何谓FBS, FCS, CS, HS ?
原帖由 00无名指00 于 2014-12-4 15:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 那何时须更换培养基?
原帖由 birdfish 于 2014-12-4 15:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度?应如何处理?
原帖由 ROSE李 于 2014-12-4 15:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?
最新回复
园丁## (2014-12-04 15:05:28)
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取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。
idea2011 (2014-12-04 15:05:48)
园丁## (2014-12-04 15:06:15)
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除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。fox_79 (2014-12-04 15:06:36)
园丁## (2014-12-04 15:07:06)
fox_79 (2014-12-04 15:07:31)
园丁## (2014-12-04 15:07:48)
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不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源, 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清, 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。dragonkilly (2014-12-04 15:08:17)
园丁## (2014-12-04 15:08:38)
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FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思, 两者都是指胎牛血清, FCS 乃错误的使用字眼, 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。00无名指00 (2014-12-04 15:09:02)
园丁## (2014-12-04 15:09:20)
00无名指00 (2014-12-04 15:09:34)
园丁## (2014-12-04 15:09:59)
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视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。 8 培养基中是否须添加抗生素? 除于特殊筛选系统中外, 一般正常培养状态下, 培养基中不应添加任何抗生素。birdfish (2014-12-04 15:10:16)
glass (2014-12-04 15:10:40)
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一般使用之trypsin-EDTA 浓度为0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中, 保存于–20 °C,避免反复冷冻解冻造成trypsin 之活性降低, 并可减少污染之机会。dodoit (2014-12-04 15:10:59)
园丁## (2014-12-04 15:11:23)
ROSE李 (2014-12-04 15:11:40)
园丁## (2014-12-04 15:12:04)
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欲回收动物细胞, 其离心速率一般为300xg (约1,000rpm),5 - 10 分钟, 过高之转速, 将造成细胞死亡。yueban-1147 (2014-12-04 15:12:22)
【讨论帖】细胞培养基本问题