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新型移动HIV-DNA检测技术

2014.6.10

  最近,在国际知名杂志《Analytical Chemistry》发表的一项研究中,美国莱斯大学的生物工程师们研发出一种简单、高度精确的检测技术,来检测患者体内的HIV迹象及病情发展情况。

  莱斯大学生物工程师、全球卫生技术学院的主任Rebecca Richards-Kortum称,当前诊断婴儿HIV和监测病毒载量的金标准,通常是依赖仅在诊所可用的实验室设备和专业技术。这项研究,开发出以核酸为基础的新型HIV检测技术,能够在医疗保健单位进行检测。

  本文共同第一作者是Richards-Kortum 实验室的研究生Zachary Crannell和Brittany Rohrman,他们开展了这项概念验证性工作,在今年早些时候,他们利用类似的技术检测到引起腹泻病隐孢子虫病的寄生虫。

  这项新型检测技术,用基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术取代了基于聚合酶链式反应的复杂实验室程序,RPA可以对血液中的遗传标记物进行快速多重扩增,从而使病毒的遗传标记物很容易地检测到。在一个被称为qRPA的检测中,利用可通过轻便机器进行定量检测的荧光探针,靶定和标记HIV DNA中的一段特定序列。最后,通过荧光DNA的软件分析,就可使得临床医生以极高的准确性,来确定病毒是否存在于患者的血液内,或病毒的量是多少。

  研究人员通过放大内部阳性对照对测试进行校准。Rohrman称:“利用跟HIV序列相同的引物扩增,因此检测试验可以正常进行。”研究人员最初只是打算寻找婴儿中的HIV,但是该技术还可以帮助他们追踪老年患者机体中的病毒载量。Crannell称:“临床医生能够实时监测患者体内的病毒载量,从而确保患者是否对治疗发生反应,这非常的重要。”

  研究人员称,为了临床可行性,一种HIV DNA检测能够定量的病毒载量,必须超过四个数量级,从很高到很低。他们称,这种新型试验很容易满足这个目标。

  他们正在开发用于资源匮乏地区的工具,在这些地区高科技实验室设备无法使用。尽管研究人员使用热循环仪来进行检测,但他们正在研究一种技术,使得整个操作步骤维持在室温和体温之间,从而确保实验的通用性和准确性。

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