【求助】聚丙稀酰胺凝胶电泳为什么就是跑不下去？

最新回复

• flower-201 (2014-5-24 11:09:42)

  
  你看看整个系统是不是一个很畅通的电流回路．
  例如：胶条撕掉了吗．
  　　　胶板上面有没有在完全在缓冲液中

• gogo (2014-5-24 11:09:59)

  
  个人认为你跑胶用的缓冲液有问题，建议重配，并且配胶所用的液体液重新检查一遍

• 66+77 (2014-5-24 11:10:28)

  再看看你的电泳仪是否受功率设置的限制,这样即使你电压那么大,但后来电流会越来越小.另外,检查一下缓冲液的pH值.

• yueban-1147 (2014-5-24 11:10:46)

  
  可能是电极缓冲液的问题吧。是不是电极缓冲液中的离子浓度太低了？你有没有配错？

• 987789 (2014-5-24 11:11:10)

  看一下你电泳时电流是多少（一般200v在50mA左右），10×电泳buffer是不是时间长了，重新配新鲜的

• mickeylin (2014-5-24 11:11:36)

  我已经重新配过了所有的溶液，电极缓冲液则是用一次重新配一次．不过的确是电压那么大,但后来电流会越来越小且功率也跟着变小，但功率也就是十来瓦，远远小于最大功率啊，应该不会有限制吧，电泳时电流一般在２０多左右．昨天我把Ｔris-HCl换成了Tris-柠檬酸，３－４小时是跑完了，可完全没有条带出来，Ｔris-HCl虽然很难跑下去但起码它的条带还能出来啊，郁闷死我了！请各位指点指点！谢啦！

• yjf1026 (2014-5-24 11:11:57)

  
  我也碰到过这样问题,电阻太大,样品跑不下去,或跑成拱形,最后还是停下重跑.最后把所有液体重新换过才跑出漂亮的图来.
  要重新配制溶液,确定没有错,
  另外把样品分几次跑,
  实验室别的人跑有没有问题

• lixi559 (2014-5-24 11:12:20)

  你的胶是新制的吗？？？

• mimili_901 (2014-5-24 11:12:45)

  
  估计还是缓冲液出问题了,缓冲能力不够,到后来就缓冲不动了,你改用恒流,这样电泳仪会提高电压以保证你设置的电流,但最后还是换体系

• cbou876 (2014-5-24 11:13:05)

  
  原因很多：
  1、Tris-HcL德pH可能偏酸，建议重配，用酸度计确定pH.因为我们遇到过类似的情况。
  2、电压、电流、功率的问题不大，因为，我们也用相同的电压跑，功率则更小些。
  3、检查整个系统电流是否畅通？是否有气泡？影响到电流？
  4、是否染色过短？脱色过长？

• c86v (2014-5-24 11:13:23)

  
  你制备page胶溶液的2M Tris.Cl pH值没有调好。
  它的pH一定要调到8.8，不然就会出现你试验中的情况。
  你可以用试纸 测一下。
  具体原理参见蛋白质电泳手册上的介绍。

• leifengta (2014-5-24 11:13:40)

  
  估计缓冲液出问题了,缓冲能力不够。或是整个系统不是一个很畅通的电流回路也有可能。

• leifengta (2014-5-24 11:14:01)

  
  估计缓冲液出问题了,缓冲能力不够。或是整个系统不是一个很畅通的电流回路也有可能。如果这些都对，你看看是不是胶出问题了。

• junhun (2014-5-24 11:14:21)

  
  我冒昧地问一句 你提到的分离胶里面怎么没有SDS

• mickeylin (2014-5-24 11:14:45)

  
  我用的是普通聚丙稀酰胺凝胶电泳，不是SDS聚丙稀酰胺凝胶电泳，因为我的样品不用变性，所以我的分离胶里面没有加到SDS。