2010全国质谱大会大会报告（四）
中国科学院上海有机化学研究所 郭寅龙研究员
来自中国科学院上海有机化学研究所的郭寅龙研究员做了题为“基于MALDI-FTMS 的酶活检测方法研究”的报告。郭老师介绍，MALDI离子化方式具有以下优势：MALDI-MS可耐高浓度盐、缓冲液和其他非挥发性成分，具有较大的样品处理能力和样品分析速度。傅立叶变化质谱检测器又具有以下优势：分辨率高、质量范围宽、准确度高、灵敏度不受分辨率影响；不需要外部设备，用软件执行就可以实现多级质谱串联；与软电离方式(ESI和MSLDI)相容性好。
郭老师介绍了，实验中建立的简单快速的牛奶中β-内酰胺酶的MALDI-MS检测方法，即通过检测β-内酰胺酶催化的酶反应来反映β-内酰胺酶的活性，采用高速离心的方法可以减少牛奶中干扰小分子检出的物质。傅立叶变换质谱的高分辨和高质量准确性使其可以排除复杂的样品基质干扰，该方法可以扩展用于更为复杂的体系。质谱仪器的高选择性，可以在检测β-内酰胺酶的同时，对牛奶样本中存在的其他残留进行检测。
美国哥伦比亚Missouri医学院 Gu, Zezong(顾泽宗)教授
来自美国哥伦比亚Missouri医学院的Gu, Zezong(顾泽宗)教授，做了题为“Quantitative Profiling of S-Nitrosylated Proteins in Parkinson’s Disease Paradigms with the Effects of Botanical Phenolics”（在植物酚效应下定量研究帕金森病病例中的S-亚硝基化蛋白）的报告。在报告中，顾教授先介绍了跟衰老相关的神经疾病如帕金森病（PD）的起因，是由自由基活性的氮氧化物（RNS/ROS）引起的，会导致神经细胞死亡，和发病机制相关。自由基氮氧化物（NO）是一种广泛调节从发展到疾病的细胞功能的信号分子。课题组研究了其机理，并开发了基于凝胶的蛋白质组学方法，命名为NitroDIGE，在全局范围去定量研究蛋白S-nitrosylation（S-亚硝基化）。应用该方法，课题组鉴定了以帕金森病的体内和体外模型的S-亚硝基化蛋白的一个子集，并测定了在细胞帕金森病模型中是否S-亚硝基化蛋白会被不同的植物酚类物质（如来源于绿茶的儿茶素、来源于胡黄连的夹竹桃麻素等）的调控。NitraoDIGE方法显示用植物化合物治疗后，能够减少过量的S-亚硝基化蛋白，表明植物酚类物质能够有效减轻硝化压力和帕金森病相关的困扰。以下是英文摘要：
A convergent feature for most aging-related neurological diseases, such as Parkinson’s Disease (PD), is excessive generation of free radicals-reactive nitrogen and oxygen species (RNS/ROS), which can contribute to neuronal cell death and link to the disease pathogenesis. Free radical nitric oxide (NO) is a signaling molecule involving in the regulation of a wide range of cellular functions from development to disease. Emerging evidence suggests that nitrosative stress due to NO over-production induces post-translation modifications of protein cysteine and modulates protein enzymatic activity in cells. S-Nitrosylation, the covalent adduction of NO to specific protein cysteine thiol, is considered as a predominant, redox-based prototypical mechanism for cell signaling .Previously, endogenous protein S-nitrosylation was detected by the biotin switch assay. Taking the advantages of both biotin switch assay and differential in-gel electrophoresis (DIGE),we developed a gel-based proteomics method, named as NitroDIGE, to globally and quantitatively investigate protein S-nitrosylation. Using this method we identified a subset of S-nitrosylated proteins from both in vitro and in vivo models of Parkinsonism including pesticide rotenone-induced PD-models could be modulated by different botanical phenolic compounds, including epigallocatechin galllate(EGCC) from green tea, and apocynin from Picrorhiza kurrooa, a herbal plant grown in the Himalayan. The NitroDIGE results demonstrated that the treatment of botanical compounds could reduce excessive S-nitrosylated proteins in SH-SY5Y cells exposed to rotenone,indicating that these botanical phenolics could serve as effective scavengers to attenuate nitrosative stress and PD-relevant insults.
北京大学 刘虎威教授
来自北京大学的刘虎威教授做了题为“在线正反相二维液相色谱四级杆飞行时间质谱联用方法及其在大鼠腹膜表层脂质轮廓分析中的应用”的报告。报告中，刘教授介绍了有关动物体内磷脂的分析。与磷脂有关的疾病有动脉粥样硬化、糖尿病、肥胖证、帕金森综合症等。磷脂的分类中，极性的结构适合用正向色谱分离，长链的脂肪酸适用于反向色谱分离，只用一种色谱进行分离，达不到很好的效果。如果将正向与反向联用，可以提高分离效率。但是，正向色谱的流动相是有机相，而反向色谱的流动相是水相，从第一维向第二维切换的过程中容易造成堵塞，因此，改进接口技术是关键。
刘教授利用改进的接口技术并将将液相色谱四级杆飞行时间质谱联用，对于大鼠腹膜表层脂质进行分析，结果显示，检测到1万多个化合物，而之前用毛细管电泳与质谱联用的时，只检测到96个化合物，刘教授提出，复杂的数据处理仍是需要解决的问题。
