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【求助】BSA封闭液做为一抗稀释液可以反复用吗
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发表于: 2014-4-18 16:26 作者: 豆龟 来源: 分析测试百科网
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【求助】BSA封闭液做为一抗稀释液可以反复用吗
以前买的是专门的一抗稀释液,现在用完拉,想换BSA液做封闭液用,因为牛奶太容易坏了,请问可以长期保存么么,谢谢诶,5%可以么,哈哈
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【求助】BSA封闭液做为一抗稀释液可以反复用吗
我也来说两句
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了了
(2014-4-18 16:27:31)
5%BSA配完放冰箱就是了
不过BSA还是有点贵,脱脂奶粉挺好的,现用现配就是了
豆龟
(2014-4-18 16:27:56)
呵呵,谢谢你 ,我的意思是,用牛奶不能长期保存,我以前用倒贴法,一次一微升抗体,用完和牛奶一起都甩了,但是现在用袋封法,一次七八微升抗体,很珍贵的,然而用牛奶当稀释液用不了几次就臭了,用BSA稀释抗体是不是可以反复用啊
wood533
(2014-4-18 16:28:24)
BSA确实有点贵,我们在牛奶中加千分之0.2的叠氮钠,放4度可保存2月左右
bamboo16
(2014-4-18 16:28:40)
NaN3对HRP是强烈抑制剂,如果你使用的是HRP标记~建议要么更换防腐剂,要么延长洗膜时间和次数。
其他防腐剂可以选择:硫柳汞钠、极少量的氯仿(1~2ul就可以)
kuaizige
(2014-4-18 16:30:08)
BSA和牛奶一样,只要不臭,就可以反复使用,而且,有的高手提议放的时间长一点,效果反而更好,也许是溶解的更为彻底的缘故吧。
豆龟
(2014-4-18 16:31:14)
都一样吧,在不加防腐剂的情况下,两者的保存时间都不久。
我们实验室是牛奶+叠氮钠,虽然用的是HRP,但只要洗膜时间有保证,一般问题不大。
加了防腐剂的牛奶可以用蛮长时间的,一个月应该没问题吧。
还有一点就是,有的蛋白用BSA会更好,有的蛋白则用牛奶会更好,这是我的个人经验,因为曾经用两种稀释液做过同一个样品同一个蛋白的western,结果证实牛奶的背景更干净,特异性更好,BSA的则会有杂带。
rxcc33
(2014-4-18 16:31:44)
NaN3对HRP是强烈抑制剂,如果你使用的是HRP标记~建议要么更换防腐剂,要么延长洗膜时间和次数。
其他防腐剂可以选择:硫柳汞钠、极少量的氯仿(1~2ul就可以)
=========================================
如果想回收封闭用的BSA,加多少比例的氯仿合适呢?
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【求助】BSA封闭液做为一抗稀释液可以反复用吗
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了了 (2014-4-18 16:27:31)
5%BSA配完放冰箱就是了
不过BSA还是有点贵,脱脂奶粉挺好的,现用现配就是了
豆龟 (2014-4-18 16:27:56)
呵呵,谢谢你 ,我的意思是,用牛奶不能长期保存,我以前用倒贴法,一次一微升抗体,用完和牛奶一起都甩了,但是现在用袋封法,一次七八微升抗体,很珍贵的,然而用牛奶当稀释液用不了几次就臭了,用BSA稀释抗体是不是可以反复用啊
wood533 (2014-4-18 16:28:24)
BSA确实有点贵,我们在牛奶中加千分之0.2的叠氮钠,放4度可保存2月左右
bamboo16 (2014-4-18 16:28:40)
NaN3对HRP是强烈抑制剂,如果你使用的是HRP标记~建议要么更换防腐剂,要么延长洗膜时间和次数。
其他防腐剂可以选择:硫柳汞钠、极少量的氯仿(1~2ul就可以)
kuaizige (2014-4-18 16:30:08)
豆龟 (2014-4-18 16:31:14)
都一样吧,在不加防腐剂的情况下,两者的保存时间都不久。
我们实验室是牛奶+叠氮钠,虽然用的是HRP,但只要洗膜时间有保证,一般问题不大。
加了防腐剂的牛奶可以用蛮长时间的,一个月应该没问题吧。
还有一点就是,有的蛋白用BSA会更好,有的蛋白则用牛奶会更好,这是我的个人经验,因为曾经用两种稀释液做过同一个样品同一个蛋白的western,结果证实牛奶的背景更干净,特异性更好,BSA的则会有杂带。
rxcc33 (2014-4-18 16:31:44)
其他防腐剂可以选择:硫柳汞钠、极少量的氯仿(1~2ul就可以)
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如果想回收封闭用的BSA,加多少比例的氯仿合适呢?
【求助】BSA封闭液做为一抗稀释液可以反复用吗