迪马科技:奶粉中雌激素和孕激素的检测方法

2010-8-16 17:31 来源: 迪马科技
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   奶粉激素事件引起了社会各界的高度关注,迪马科技作为助您保障人类食品、环境、药品安全的实验合作伙伴,开发出下列分析方法,能够满足奶粉中雌二醇、雌三醇、炔雌醇、雌酮、己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚等雌激素以及孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸氯地孕酮、甲基炔孕酮、甲羟孕酮等孕激素的检测。希望能对您的检测工作提供帮助。

  1  反相SPE净化方法

  1.1 提取

  称取2.0 g奶粉(精确至0.01 g),加入内标液(使用内标法时才需加入内标液),加入16 ml 80%甲醇水溶液,振荡提取2 min或超声提取5 min。6000 rpm下离心5 min,取4 ml上清液,加入12 ml纯水,混匀得到样品稀释液,待净化。

  1.2 SPE柱净化

  ProElut PLS亲水亲脂平衡柱,150 mg/6 ml

  活化、平衡:5 ml甲醇活化,5 ml水平衡;

  上样:让样品稀释液通过PLS小柱,流出液弃去;

  淋洗:5 ml 5%甲醇水溶液淋洗,淋洗液弃去;

  洗脱:5 ml纯甲醇洗脱,收集洗脱液;

  样品重组:40 ℃下将洗脱液氮气吹干,用1 ml 50%甲醇水溶液重新溶解残渣,微孔滤膜过滤后供仪器分析

  2  正相SPE净化方法

  2.1 提取

  称取2 g奶粉(精确至0.01 g),加入内标液(使用内标法时才需加入内标液),加入20 ml 80%甲醇水溶液,振荡提取2 min或超声提取5 min。6000 rpm下离心5 min,取10 ml上清液,与50 ml纯水混合得到样品稀释液,待净化。

  2.2 SPE柱净化

  ProElut CARB石墨化炭黑柱,500 mg/6 ml

  ProElut NH2氨基柱,500 mg/6 ml

  将样品稀释液通过经活化的ProElut CARB柱*,液体全部通过后将小柱抽干。然后将经活化的ProElut NH2柱*串接在ProElut CARB柱下方。10 ml二氯甲烷-甲醇溶液(7+3)洗脱并收集洗脱液,然后取下ProElut CARB柱,用2 ml二氯甲烷-甲醇溶液(7+3)洗脱ProElut NH2柱,合并洗脱液。然后氮气吹干洗脱液,再用1 ml 50%甲醇水溶液溶解残渣,微孔滤膜过滤后供仪器分析。

  *ProElut CARB柱依次用6 ml二氯甲烷-甲醇溶液(7+3)、6 ml甲醇、6 ml水活化平衡;ProElut NH2柱活化平衡

  3  仪器分析

  3.1 雌激素分析条件

  A HPLC条件:

  色谱柱:Leapsil C18,100 x 2.1mm,2.7 μm

  流动相:A,水;B,乙腈

  梯度:略

  流速:0.3 ml/min

  柱温:40 ℃

  进样体积:10 μl

  B 质谱条件

  电离源:ESI,负电离模式

  电离源温度:100 ℃

  毛细管电压:3 kV

  脱溶剂气体温度:450 ℃

  脱溶剂气体流量:0.2 l/min

  3.2 孕激素分析条件

  A HPLC条件

  色谱柱:Leapsil C18,100 x 2.1mm,2.7 μm

  流动相:A,0.1%甲酸水溶液;B,甲醇

  梯度:略

  流速:0.3 ml/min

  柱温:40 ℃

  进样体积:10 μl

  B 质谱条件

  电离源:ESI,正电离模式

  毛细管电压:3.5 kV

  电离源温度:100 ℃

  脱溶剂气体温度:450 ℃

  脱溶剂气体流量:0.2 l/min

  关于迪马

  迪马科技是一家致力于研发制造科学、高效的化学分析产品,提供完善服务和全面解决方案的知名色谱消耗品制造商,在色谱填料研发,色谱柱制造和相关分离产品等多个技术领域始终保持世界先进水平。核心技术产品包括:液相色谱柱、气相色谱柱、固相萃取柱、色谱溶剂和化学标准品。