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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2013-6-08 17:47 作者: 算盘阿星 来源: 分析测试百科网
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原帖由 summerxx 于 2013-6-8 17:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 没有,实验室做western blot 无数,从来没有人看过反正,也从来没因此有过问题.
最新回复
utt0989 (2013-6-08 17:47:40)
没有的,转膜后,因一面有蛋白,另一面没有,所以就有正反之分了。可以在论坛里搜索下。
tangxin_80 (2013-6-08 17:48:04)
如果仔细观察,PVDF膜的一面较光滑,而另一面较粗糙,就像过滤除菌用的滤膜一样。
summerxx (2013-6-08 17:48:28)
算盘阿星 (2013-6-08 17:48:53)
QUOTE:
是呀 哦也是做试验无数 突然师妹问这问题 仔细一看果然膜两面不一样说明书未提及有差异 看来真的无所谓正反
谢谢诸位的讨论
831226 (2013-6-08 17:49:59)
膜两面是不一样的,不过,我全试过,都没问题,呵呵
bs4665 (2013-6-08 17:50:22)
下次 瞧瞧
gemei0115 (2013-6-08 17:50:42)
个人认为模式没有正反的,但凸面和胶相接触容易排尽胶和膜之间的气泡,同时,转膜后也不存在反正的问题,因为膜是有一定孔径的,转膜后,蛋白并不是简单沾在膜上,而是嵌入膜中了,所以,膜的两侧都有蛋白,并且,我在作的时候也的确是这样。
woshiduiyan (2013-6-08 17:51:12)
我用的PVDF膜,操作中没有出错,可就是转不上,Marker大部分跑到膜下的滤纸上了。有人说是膜放反了。到底怎么回事?很困惑。
sunnyB (2013-6-08 17:51:35)
是不是短路了?
kuaizige (2013-6-08 17:52:03)
我都是将凹面朝胶,作为正面,这样加抗体时就方便了.
yes4 (2013-6-08 17:53:41)
redbutterfly (2013-6-08 17:54:08)
ha111 (2013-6-08 17:54:27)
windy+++ (2013-6-08 17:55:09)
搞清楚正反极,另外注意优化转膜的时间以及电压!
89tongzijun (2013-6-08 17:58:45)
我买的是凌飞的PVDF膜,它的确有正反。你在日光灯下观察,比较反光的一面是正面,转膜时要紧贴着胶的。另一面比较粗糙,在膜没有放入转印液前,是可以肉眼辨别出来的。
98776langtao (2013-6-08 17:59:14)
PVDF膜或者NC膜都是有正反面的,但是对实验是没有影响的,尽可以放心使用。
987789 (2013-6-08 18:00:59)
有正反面,不过我两面都用过,都没问题。个人认为转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面,有时候在发光压片的时候,把背胶的一面朝上,就压不条带,或者条带很弱。 我一般都在甲醇泡pvdf膜之前,在膜的一角用铅笔做标记,转膜时标记的背面与胶接触。
PPT (2013-6-08 18:01:51)
会不会转过了,蛋白跑过膜,所以到了滤纸上了?
leifengta (2013-6-08 18:02:18)
079777chao (2013-6-08 18:02:39)
膜是有孔径的,所以,没转反也可能转过头了八。
建议看一下膜的孔径,控制转的时间和电流
【求助】western blot PVDF 膜有正反吗?