博纳艾杰尔不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的解决方案

2011-6-13 14:05 来源: 博纳艾杰尔科技
收藏到BLOG

  随着现代食品工业的发展,人们为了增加食品的风味、改善色泽和延长货架期等,采用了多种现代食品加工技术,但是不幸的是,由于种种原因,在某些食品加工过程中使用了危害人们健康的物质,比如最近出现的食品中添加“塑化剂”邻苯二甲酸酯类物质。

  以往,由于人们对邻苯二甲酸酯类的安全性认识不足,多种食品都涉嫌“被添加”。博纳艾杰尔科技根据不同食品基质的具体情况,开发了一系列的检测方案,以供大家参考。

  相关产品或技术咨询请拨打400-606-8099或E-mail至service@agela.com.cn

  博纳艾杰尔网站www.agela.com.cn

  1.水性样品

  此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水,茶、果汁和功能饮料等;某些可水溶解的固体样品。可以先制成水溶液,然后全部作为待处理液,如无脂糖果。推荐前处理柱为Cleanert DEHP (500mg/6mL)。

  样品处理:取10mL样品,进行固相萃取富集处理

  固相萃取方法:

  活化:5mL甲醇、5mL水

  上样:10mL水性样品

  淋洗:5mL5%甲醇水,真空抽干20min。

  洗脱:5mL甲醇

  检测:将洗脱液用氮气吹干后,以1mL甲醇定容,然后用液相色谱法检测。

  说明:此法多适用于配套液相色谱检测,当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时,需要采用固相萃取富集才能检测的情况。

  一般来说,对于此类样品,可以采用正己烷液液萃取的办法,用GC/MS(灵敏度较高)直接检测。

  2.低脂液体样品

  此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理产品为Cleanert MAS-PAE管。

  样品处理:向玻璃离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。

  检测:GC/MS检测。

  3.低脂固体食品

  此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等,推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。

  样品处理:取1g已制成粉末状的样品,2mL水,加入到Cleanert MAS-PAE离心管中,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。

  检测:GC/MS检测。

  4.高脂样品

  此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等,推荐前处理柱为Cleanert PAE。

  4.1 动植物油脂样品的处理

  取0.2g样品,用1mL正己烷溶解,作为待净化液。

  固相萃取方法:

  活化:5mL正己烷

  上样:全部待净化液

  淋洗:7mL正己烷

  洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。

  40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL玻璃样品瓶中,作为待检液。

  检测:GC/MS检测。

  4.2其他样品的处理

  取样品0.5g,以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取,然后以4000rpm转速,离心5min,取上清液作为待净化液。若样品中含有水,视情况加入适量无水硫酸钠后,再进行上述操作。

  固相萃取方法:

  活化:5mL正己烷

  上样:全部待净化液

  淋洗:3mL正己烷

  洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。

  40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。

  检测:GC/MS检测。

  5.复杂样品

  此类样品多为油水混合态,同时添加有多种风味物质,成分比较复杂,包括方便面调味包,酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量,对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱,对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。

  5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理,以方便面调味包为例:

  取0.5g样品,加入5mL正己烷,涡旋振荡3min后,再加入500mg无水硫酸钠,涡旋振荡3min后,以4000rpm转速,离心5min,取全部上清液作为待净化液。

  固相萃取方法:

  活化:5mL正己烷

  上样:全部待净化液

  淋洗:3mL正己烷

  洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷:甲苯(50:40:10,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。

  检测:GC/MS检测。

  5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理,以酱油为例

  样品处理:向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲苯(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAEc填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。

  检测:GC/MS检测。

  附件一:

高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量

  色谱柱:Agela Venusil XBP C18-L ,4.6×250mm,5µm,150Å(订货号:VX952505-L)

  流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50

Time/minA/%B/%
04060
25050
106040
127030
207030
311000
401000
40.014060

  流 速:1.0 mL/min

  波 长:242 nm

  进样量:5 µL(100ppm),50µL(10ppm)

  样 品:15种邻苯二甲酸酯

  浓 度:100 ppm(正己烷),10 ppm(40%流动相A)

  溶 剂:正己烷 /40%流动相A

  柱 温:30℃

图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:10ppm)

  (邻苯二甲酸二甲酯DMP,邻苯二甲酸二乙酯DEP,邻苯二甲酸二正丁酯DBP,邻苯二甲酸二辛酯DEHP,邻苯二甲酸丁苄酯BBP,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯DEHP,邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯DMEP,邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP,邻苯二甲酸二戊酯DPP,邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP,邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP,邻苯二甲酸二环己酯DCHP,邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,邻苯二甲酸二己酯DNP,邻苯二甲酸二壬酯DINP)

  结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。

  

  附件二

气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯

  

  仪器:Agilent 7890/5975 GC/MS

  色谱条件:

  色谱柱:DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm

  进样口:250℃,不分流进样

  程序升温:50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min)

  进样量:1μL

  流速:1 mL/min

  

  质谱条件:

  接口温度:280℃

  电离方式:EI

  电离能量:70eV

  溶剂延迟:7min

  监测方式:SIM模式,监测离子见下表

  

序号保留时间/min中文名称英文缩写SIM离子
18.265邻苯二甲酸二甲酯DMP163、77
29.135邻苯二甲酸二乙酯DEP149、177
310.888邻苯二甲酸二异丁酯DIBP149、223
411.637邻苯二甲酸二丁酯DBP149、223
511.979邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯DMEP59、149、193
612.72邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP149、251
713.044邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯DEEP45、72
813.41邻苯二甲酸二戊酯DPP149、237
915.552邻苯二甲酸二己酯DHXP104、149、76
1015.694邻苯二甲酸丁基苄基酯BBP149、91
1117.153邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯DBEP149、223
1217.81邻苯二甲酸二环己酯DCHP149、167
1318.056邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯DEHP149、167
1420.444邻苯二甲酸二正辛酯DNOP149、279
1522.98邻苯二甲酸二壬酯DNP57、149、71

  结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。

  

  附件三

牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率

  按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:

  表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表

序号保留时间/min中文名称英文缩写回收率
18.337邻苯二甲酸二甲酯DMP87.82%
29.214邻苯二甲酸二乙酯DEP72.31%
310.996邻苯二甲酸二异丁酯DIBP81.97%
411.759邻苯二甲酸二丁酯DBP77.33%
512.11邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯DMEP83.87%
612.864邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP83.83%
713.201邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯DEEP109.08%
813.576邻苯二甲酸二戊酯DPP86.36%
915.757邻苯二甲酸二己酯DHXP84.67%
1015.923邻苯二甲酸丁基苄基酯BBP98.33%
1117.377邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯DBEP101.30%
1218.041邻苯二甲酸二环己酯DCHP92.47%
1318.28邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯DEHP132.32%
1420.718邻苯二甲酸二正辛酯DNOP89.73%
1523.303邻苯二甲酸二壬酯DNP70.10%

某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率

  按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:

  表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表

序号保留时间/min中文名称英文缩写回收率
18.337邻苯二甲酸二甲酯DMP149.97%
29.214邻苯二甲酸二乙酯DEP93.49%
310.996邻苯二甲酸二异丁酯DIBP125.70%
411.759邻苯二甲酸二丁酯DBP136.89%
512.11邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯DMEP90.84%
612.864邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP82.29%
713.201邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯DEEP106.38%
813.576邻苯二甲酸二戊酯DPP88.14%
915.757邻苯二甲酸二己酯DHXP75.32%
1015.923邻苯二甲酸丁基苄基酯BBP89.56%
1117.377邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯DBEP105.05%
1218.041邻苯二甲酸二环己酯DCHP72.94%
1318.28邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯DEHP124.27%
1420.718邻苯二甲酸二正辛酯DNOP78.19%
1523.303邻苯二甲酸二壬酯DNP75.27%