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成都生物所获得热稳定大幅度提高的羰基还原酶突变体

2016.3.03

  中国科学院成都生物研究所吴中柳课题组研究人员从实验室已有菌株Chryseobacterium sp. CA49中筛选得到酶学性能优良的羰基还原酶ChKRED20。为进一步提高该酶的热稳定性,从而提高时空效率和工艺灵活性,课题组运用定向进化手段实施分子改造,通过对随机突变文库的筛选和有益位点整合,获得了热稳定性大幅度提高的突变体M135,其反应活性未受影响。最适反应温度升高至65°C,而且在65°C非常稳定,连续处理15天后残余活性大于95%,而野生型在此条件下的热失活半衰期仅为12分钟。突变体在65°C条件下转化底物的时空产率比母本有很大程度的提高,3g/L的粗酶液可在1h内完全转化300g/L的COBE底物(Liptor边链,阿托伐他汀等医药中间体),ee值>99%,具有良好的工业应用前景。

  该研究成果发表于Appl Microbiol Biotechnol, 2015. DOI 10.1007/s00253-015-7200-2。

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突变体M135

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