氰化物检测——异烟酸一吡唑啉酮比色法

[size=10.5pt]①仪器：分光光度计。

[size=10.5pt]②试剂

[size=10.5pt]a[size=10.5pt]．0．2％NaOH液。

[size=10.5pt]b[size=10.5pt]．饱和酒石酸液。

[size=10.5pt]c[size=10.5pt]．1％酚酞乙醇指示剂。

[size=10.5pt]d[size=10.5pt]．乙酸液(1+6)。

[size=10.5pt]e[size=10.5pt]．磷酸盐缓冲液(pH7)。

[size=10.5pt]f[size=10.5pt]．1％氯胺T液(临用时配)。

[size=10.5pt]g[size=10.5pt]．异烟酸一吡唑啉酮液：取异烟酸1．5 g，溶于2％NaOH液24 mL，水定容至100 mL[size=10.5pt]；另取吡唑啉酮O．25 g，溶于N—二甲基甲酰胺中，两液合并混匀。

[size=10.5pt]h[size=10.5pt]．KCN标准贮存液(O．1mg·mL-1[size=10.5pt])[size=10.5pt]：准确称取KCNO．25 g，用水溶解并定容至1[size=12.0pt]L。

[size=10.5pt]i[size=10.5pt]．KCN标准应用液(1µ[size=10.5pt]g[size=10.5pt]·mL-1[size=10.5pt])([size=10.5pt]用O．1％NaOH稀释定容)。

[size=10.5pt]③标准曲线制备：分别吸取KCN标准应用液(1 µ[size=10.5pt]g[size=10.5pt]· mL-1[size=10.5pt])0[size=10.5pt]．0 mL、0．5 mL、1．0 mL、1．5 mL、2．0 mL、2．5 mL，于10 mL比色管中，各加0．2％NaOH液至5mL，混匀，放置10min，加2滴1％酚酞乙醇指示剂，用(1+6)乙酸调到红色褪去，加0．2％NaOH液调至呈红色，加磷酸盐缓冲液(pH7)2 mL、l％氯胺T液0．2 mL，混匀，30℃，5 min后，加异烟酸一吡唑啉酮液2 mL[size=10.5pt]，用水定容至10 mL，混匀，30℃放置30 min，用1 cm比色皿，空白管调零，于波长638nm处测吸光度，记录各管吸光度，绘制标准曲线。

[size=10.5pt]④检测：吸取1 mL酒样于10 mL具塞比色管中，加0．2％NaOH液至5 mL，混匀，放置10 min，加2滴l ％酚酞乙醇指示剂，用(1+6)乙酸调到红色褪去，加0．2％NaOH液调至呈红色，加磷酸盐缓冲液(pH7)2 mL、1％氯胺T液0．2 mL，混匀，30℃，5 min后，加异烟酸一吡唑啉酮液2 mL，用水定容至10 mL，混匀，30℃放置30 min，用1 cm比色皿，空白管调零，于波长638 nm处测吸光度(同时做正常酒对照)。根据所测酒样吸光度即可查得酒样中氰化物含量。

[size=10.5pt]⑤计算

[size=10.5pt]  X=(CS*1000)/(V*1000)

[size=10.5pt]式中：X——酒中氰化物含量(按HCN计)，mg·L-1[size=10.5pt]；

[size=10.5pt]   
CS[size=10.5pt]——样液吸光度查标准曲线得含量，肚g；

[size=10.5pt]   
V[size=10.5pt]——样品体积，mL。

[size=10.5pt]⑥说明

[size=10.5pt]a[size=10.5pt]．配制KCN标准液标定，取标准贮存液10 mL于锥形瓶中，加2％NaOH液1 mL，pH>11，加0．02％对二甲氨基亚苄基罗丹宁丙酮0．1 mL，用0．02 mol·L -1[size=10.5pt]AgNO3[size=10.5pt]标准液滴定至呈橙红色。

[size=10.5pt]b[size=10.5pt]．如酒样浑浊或有色时，取样液25 mL，于全玻璃蒸馏器中，加0．2％NaOH液5 mL，10min后用饱和酒石酸液调成酸性进行蒸馏，加锥形瓶中，加0．2％NaOH液lO mL吸收馏出液至50 mL，取馏出液2 mL于10 mI。比色管中，加0．2％NaOH液至5 mL，以下按样品检测步骤操作。

[size=10.5pt]c[size=10.5pt]．氯胺T有效氯含量应大于11％，临用时配制，必要时用碘量法标定。

[size=10.5pt]d[size=10.5pt]．显色剂也应临用时配制，存放时间过长，会降低显色效果。

[size=10.5pt]e[size=10.5pt]．显色pH值以控制在6．7～6．9为宜。

[size=10.5pt]f[size=10.5pt]．醇对本法有干扰，可将蒸馏液在碱性条件下，在水浴上蒸除醇类，溶解残渣后依检测步骤操作。也可加少量2％吐温80与5％EDTA以抑制醇产生浑浊的干扰。