【求助】制备型HPLC的最大上样量

字体: 小中大 | 打印发表于: 2014-9-17 15:37 作者: yizhi 来源: 分析测试百科网

要做一个制备型HPLC，但是不知道最大上样浓度和体积为多少.知道要根据柱子的体积来算，但是我问过技术人员（要到其他实验室做），他说最大上样体积为80微升，最大上样浓度为0.5微克/毫升,这是不是太少了呀。这样我分离1克/毫升得样品要做多少次呀！实在不明白。请教高手了！

ladyhuahua (2014-9-17 15:37:24)

这不好说
一要看你的设备和柱子的大小,
二要看你的样品是什么?
还要看你样品中的杂质情况
总之,要做实验!!!
junhun (2014-9-17 15:39:11)

那就慢慢加，一直到你的仪器分不开为止
羊咩咩 (2014-9-17 15:39:33)

对，只能做实验验证！
yyaxw84 (2014-9-17 15:39:58)

应该是自己根据实际情况，自行设计实验考察。
也可先查阅相关文献，再进行实验设计。
zhy平平 (2014-9-17 15:40:15)

我的柱子是250mm*10mm的半制备柱，泵流速最大可达到5ml/min，样品是正丁醇萃取物经大孔吸附树脂75%乙醇洗脱部分，想直接用液相分离，上样量最大能达多少?样品浓度配成100mg/ml时颜色是黑的，能直接上柱吗，会不会堵柱子啊。
kswl870 (2014-9-17 15:40:52)

可以根据分析色谱柱的结果，来决定制备色谱柱的上样量。实际上样量以相邻的杂质峰想接触为基准
ALALA (2014-9-17 15:41:11)

这个要实验摸索的，先用分析柱把方法摸索好，分离度越大越好，这样才能保证大量上样的时候获得较好的分离度

10*250的柱子通常一次分离几十毫克差不多了（多肽样品）至于你的样品，性质不同，可能载量有差别，还是得实验……