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【求助】组织蛋白变性后的半凝固沉淀
提取肝癌组织蛋白以后,不知道为什么都会在煮了5分钟以后管底出现白色的半凝固的沉淀,然后把PCR管倒过来这些凝固也不会流下来,用手弹一下倒是会下来【求助】组织蛋白变性后的半凝固沉淀
我用的是200ul的pcrG管装(是不是太小了),,蛋白已离心留上清,装80ul蛋白提取液和20ul的5*SDS上样缓冲液(碧云天),用水煮到沸腾,5min。
还是因为蛋白浓度太高??用BCA测定浓度在10ug/ul左右
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最新回复
efp (2016-2-11 14:36:58)
今生如此 (2016-2-11 14:37:23)
10ug/ul的蛋白质浓度对做western blot来说不算太高,还不至于加热下就形成沉淀,至少我在实验中这种浓度的蛋白质还没有出现过加热生成沉淀的情况;请问你在western blot实验中发现过这种浓度的蛋白质受热沉淀吗?
daomei (2016-2-11 14:37:45)
如果可以建议你换个 上样缓冲液 试试~
哈密瓜 (2016-2-11 14:38:06)
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