【求助】溶剂峰还是样品峰?

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【求助】溶剂峰还是样品峰?
求救啊,进了两针,分别样品和样品的空白溶液。结果前面出了一堆峰,远大于样品峰(17min左右)。前段的到底是溶剂峰还是样品峰?
     分析的样品为多肽,空白溶液为Tris—HCl+NaCl。250*4.6的C18的柱子,乙腈:水(均含0.1%TFA)梯度洗脱:60minACN(10%到30%),室温操作,自动进样。
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最新回复

  • xgy412 (2016-3-14 18:10:06)

    两个图里都有前面的那一堆峰,肯定是溶剂空白峰啊
  • yayayu (2016-3-14 18:10:25)

    没有大问题。不影响含量测定。
    产生的问题在于没有用流动相稀释样品,空白也算。
  • huali (2016-3-14 18:10:47)

    问题是,这峰的响应值也太夸张了吧。同时还有一个问题,如果它是溶剂空白峰,引起这个吸收的物质应该是什么呢?Tris?HCl?还是NaCl呢?
  • 美人鱼 (2016-3-14 18:11:06)

    如果想知道,可以单独进每一个,我觉得没必要,不影响测量就OK,再就是有可能是三者共同影响的
  • xiaoxiaoai (2016-3-14 18:11:35)

    ok:溶剂峰,居然无法选择应助。。。
    流动相溶解样品,分析方法再优化一下。
  • huali (2016-3-14 18:12:05)

    因为判断不了是否会影响测量。样品是我们自己研发出来的,没有对照可言。而且相对来说,生物发酵出来的肽类物质比较杂且前面的峰太大了,怕给前面的峰掩盖掉了。我们要做纯度的检测,能否忽略前段峰进行面积归一计算呢?
  • 钻石 (2016-3-14 18:12:25)

    如果用流动相稀释样品,怕导致主峰变小了,被掩盖掉了
  • 小熊妮妮 (2016-3-14 18:12:43)

    没关系的  我以前做多肽也是这样 你进个空白样看看  前面应该还是会有这些峰
  • 小女人@ (2016-3-14 18:13:11)

    两个都有,对比两针的相同的地方。
  • hcy517 (2016-3-14 18:13:30)

    是溶剂峰吧 而且空白和样品都有峰 个人觉得不是问题吧
  • 大大 (2016-3-14 18:13:53)

    是啊,这个应该不用怀疑了吧!而且你可以用样品扣除一下溶剂空白,前面应该是一条水平的直线,所以前面的大峰可以不用考虑的……
  • xiaoxiaojinglin (2016-3-14 18:14:17)

    想知道是系统峰还是样品峰很简单 只要在相同条件下 把样品进样量加大一倍 再进样进行与之前的样品进行对比 如果前面的峰图不变,后面的峰图的峰面积增大或峰高变高,那说明前面的是系统峰。如果是系统峰,无论峰形怎样,只要不影响你要测定的物质,就可以不用管它是怎么形成的。
  • yayayu (2016-3-14 18:14:44)

    可以忽略前面的做纯度检测,建议楼主用流动相溶解样品,这样可以避免前面出峰有较大的影响,如果流动相实在溶解不了用可以溶解的溶剂溶解在用流动相稀释影响比较小
  • 今生如此 (2016-3-14 18:15:07)

    可能是你加的缓冲液的UV截止波长比较高从而引起流动相的吸收本底较高,你可以换一种UV截止波长较低缓冲液试试哈。。。
  • 大花猫bb (2016-3-14 18:15:31)

    有个办法可以帮你判断下是不是溶剂峰。你增大样品配置浓度,如果前面倒峰和空白一致,那么这些峰肯定是空白里的,不是样品的峰。如果前面倒峰增大了,有两种可能:1种是样品里的峰。2种是样品和空白溶剂一起产生的峰。如果是前者就ok了。如果是后者,即倒峰增大了,那么建议楼主更换稀释剂,使用流动相来稀释样品。
  • mimima (2016-3-14 18:15:58)

    直接进溶剂,就好了,一般算下死体积,250的柱子,1ml流速死体积在2min多点吧。每家的柱子不一样,有一定的误差。你有标准物,应该是用外标法吧,那只要不影响出峰和目标峰就行了。其他次要的,具体群聊104918027
  • 兔子 (2016-3-14 18:16:20)

    建议这种情况换一下波长跑一下看看,近来做液相也出现了类似的问题,前面出了一个很大的倒峰,查文献,改了波长后就好了
  • efp (2016-3-14 18:16:42)

    去溶剂峰的话,可以调节波长,或者改变流动相以减少溶剂和流动相差别达到。不过对于定量而言,只要溶剂峰不干扰测定就可以了。而定性,或者纯度测定,则需要去溶剂峰才可以
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