【求助】 PCR退火温度计算

最新回复

• junhun (2014-11-29 17:24:42)

  
  总的说来，决定引物退火温度（Tm值）最重要的因素就是引物的长度。有以下公式可以用于粗略计算引物的退火温度。
  在引物长度小于20bp时：[4(G+C)+2(A+T)]-5℃
  在引物长度大于20bp时：62.3℃+0.41℃(%G-C)-500/length-5℃
  
  另外有许多软件也可以对退火温度进行计算，其计算原理会各有不同，因此有时计算出的数值可能会有少量差距。

• mingming0638 (2014-11-29 17:25:08)

  
  引物Tm是指解链温度，Tann是退火温度或复性温度，二者不能等同

• ha111 (2014-11-29 17:25:32)

  
  一个引物有两个起始端，怎么办？平均？