2015年第四届MSC研讨会制药分会场：从认识微生物开始
假如地球的历史只有1天，而地球诞生在0:00，那么微生物的诞生在清晨5:00，恐龙诞生在晚上10:00，而人类则是在夜晚11:59。地球上之所以有适合人类生存的环境全都依赖于早期微生物的光合作用。微生物在生物学中并不是一个分类名词，而是包括所有形体微小的单细胞，或个体简单的多细胞，或没有细胞结构的低等生物。简单可分为病毒、细菌、真菌。其实人类很早就开始利用微生物来做一些对人类有益的事，比如面包、酸奶、酒的制造过程就少不了微生物，小孩子从小接种的疫苗也是微生物。
但是微生物却也能要了人类的命。比如一场可怕的瘟疫，一次术后的感染，一次吃坏肚子，这些大部分都是有微生物中的致病菌引起的。所以对于与人体密切相关的，比如食品、药品就需要严格控制微生物的数量与种类。
2015年第四届MSC研讨会——制药分会场与2015年8月21日于北京友谊宾馆召开。会议旨在探讨制药过程中微生物的控制技术。在场的专家老师纷纷发表自己的看法，大会吸引了企业、政府机构等的100余人参加。
国食品药品检定研究院化药所微生物检测室副主任 马仕洪
首先由来自中国食品药品检定研究院化药所微生物检测室副主任马仕洪作了题为《药品微生物实验室规划建设、质量管理及面临的挑战》的报告。通过与2010版药典和USP、EP、JP等国外药典的比较，马仕洪介绍到，2015版药典将全面与国际接轨，药品微生物将从终产品检验向过程控制转变。马仕洪首先介绍了药品微生物，基于培养基观察的药典微生物检查技术只能区分到营养条件的生长水平，难以通过培养观察区分细胞结构。所以在2015版药典中质控分类直接分为需氧菌和厌氧菌而不是真菌和霉菌。之后还介绍了其他的微生物的基本性质。
接下来马仕洪介绍了基于过程控制的标准研究和建设。在灭菌工艺中，以物理参数表征的物理杀灭力必须以生物指示剂测定的生物杀灭力加以验证，两者大体一致才能最终确立日常应用的灭菌参数。那么，企业到底该建一个什么样的实验室呢？首先要保证无菌检查、微生物限度检查和以微生物为实验系统的一部分（阳性对照、方法验证等），建立相对应的洁净区。药品微生物实验室的生物安全是近年接受认证检查经常提到的一个问题。因为微生物实验中涉及大量的阳性菌的检测，所以人员安全就显得很重要，所以，隔离器、生物安全柜和超净工作台就非常有必要。
马仕洪还介绍了微生物实验室质量管理。主要分WHO实验室PQ认证和OOS调查两方面进行讲述。WHO指导原则涉及12方面：人员、培养基、试剂、菌种、环境、设备、样品、检验方法、污染废弃物处理、质量、实验记录、结果判断和报告。只有做好了这些，实验室才算是合格的实验室。
华瑞制药有限公司（SSPC）微生物质控部高级质量控制经理 崔强
接着是来自华瑞制药有限公司（SSPC）微生物质控部高级质量控制经理崔强带来的报告《制药企业微生物安全控制与实践》。崔强主要介绍了微生物在药品生产中的来源有原辅料、配料用水、内包装容器、制造工艺、操作人员、生产环境等。那么如何防止和消除微生物污染呢？主要分为8大要素：1、产品设计；2、原料和辅料系统微生物控制；3、生产环境操作过程控制；4、防止混淆；5、产品的密封完整性；6、灭菌工艺；7、灭菌前生产过程；8、全面质量管理体系。只有做到这些才有可能做好微生物生物安全。
上海诺狄生物科技有限公司的总经理 柴海毅
来自上海诺狄生物科技有限公司的总经理柴海毅作了题为《环境监测培养基质量控制要求》的报告。报告主要讲述了三方面的内容：1、洁净环境微生物监测风险；2、培养基风险分析与对策；3、实施正确的环境微生物监测。洁净环境微生物的监测风险主要有假阴性和假阳性两方面。因为消毒剂或者是抗生素和其他抑菌性的原辅料抑制微生物生长，所以必须通过酶解消除这些抑菌剂。但是在做加酶平板的时候，酶的种类和数量也容易让实验造成假阴性。柴海毅通过三个实例让大家看到了假阴性的存在，并且让大家明白假阴性是实验中最可怕的。在检查沉降菌的时候，培养基也有三个关键点：1、培养基的回收率；2培养基的含水量；3、培养基的放置时间。柴海毅说到，在放置2小时之后，培养基失水近10%，4小时之后培养基失水近30%，而微生物的良好生长必须保持一定的水分，所以培养基水分的多少也容易造成假阴性的结果。而假阳性的原因则是1、使用非无菌培养；2、非无菌操作；3、预培养方法不正确。所以，用于环境监测的培养基必须特别防护，最好要双层包装和终端灭菌，如果不能，那么使用前应进行100%的预培养以防止外来的污染。
美国Microbiologics公司的技术专家Laurie Kundrat
来自美国Microbiologics公司的技术专家Laurie Kundrat讲述报告《The Antimicrobial Effectiveness Test》。主要讲述了美国药典抑菌效力测定的要求，目的。目的是找到可添加至产品中抑菌剂或防腐剂的最低有效浓度。有效性和抗菌性是抗菌效能测试中的两个重要目标。在新版美国药典《51》中，下列三个测试需进行微生物控制1、促生长实验；2、适用性检查；3、抑菌效力测定。
食品药品鉴定研究院化药所微生物检测室助理研究员 杨美琴
中国食品药品鉴定研究院化药所微生物检测室助理研究员杨美琴带来了题为《药品微生物限度标准及检查技术实践》的报告。杨美琴主要讲了1、药品微生物限度检查体系沿革，中国微生物限度始于1973年，到了2015年版基本与ICH微生物检查法接轨。2、2015《中国药典》标准内容，最大可接受限度值遵守2倍规则。10的1次cfu，可接受最大限制为20。水的标准，为纯化水100cfu/mL，注射用水10cfu/mL。并且还介绍了微生物的计数方法、控制菌检查法等。3、实践讨论及小结。
广州百特侨光医疗用品有限公司的质量负责人 姚艳平
来自广州百特侨光医疗用品有限公司的质量负责人姚艳平给大家带来题为《生产过程中微生物污染控制》的报告。报告主要内容包括3个方面：1、微生物污染控制的重要性，控制因药物导致的感染和因微生物污染导致的药品疗效降低、失效或产生毒素作用。2、微生物污染的途径，主要有原辅料、包装材料、空气、水、设备容器和操作人员，其中人是主要的污染源。而且无菌测试存在着局限性，当污染率为0.01时，取20个样品，无菌检测能够检测到的无菌阳性概率仅为18%。3、微生物控制程序的关键9要素:1、人员；2、原材料和消耗品；3、设施和设备；4、公用设施；5、过程设计和验证；6、过程监控；7、产品特性；8、数据审核；9、风险管理。
浙江省食品药品检验研究所副所长 李钰
浙江省食品药品检验研究所副所长李钰给大家作了《制药用水微生物限度检查标准修订及控制现状》的报告。李钰在报告中主要讲了制药用水的4个方面。一、制药用水主要分为饮用水、纯化水、注射用水和灭菌注射用水。现在主要存在着操作繁琐，技术结果不准确，国际交流不便和不同培养体系的污染检出率有差异的问题。二、标准修订课题研究的主要内容。三、标准修订课题研究成果。四、国内制药用水控制现状。
Thermo Fisher Scientific微生物部门的市场开发经理 金伟青
来自Thermo Fisher Scientific微生物部门的市场开发经理金伟青带来了题为《赛默飞世尔新版药典解决方案》。赛默飞的OXOID和Remel部门，是整合了三个品牌的专业微生物品牌。此次他们提供了整套的微生物检测解决方案。用于微生物无菌检查用的干粉和成品培养基。无菌检查过程中的微生物监测，Remel的质控菌株——来源于ATCC的培养物。微生物鉴定从表型到基因型，Thermo提供全套解决方案。
中国工业微生物菌种保藏管理中心副主任 姚粟
最后，来自中国工业微生物菌种保藏管理中心副主任姚粟带来的题为《制药微生物鉴定技术与实践》的报告。报告主要讲述了微生物鉴定流程及相应的技术。微生物鉴定是指借助现有的分类系统，通过对未知微生物的特征测定，对其进行细菌、酵母菌和霉菌大类的区分，或属、种及菌株水平确定的过程，它是微生物检验中的重要环节。微生物鉴定程序分为分离纯化、初筛试验、表型微生物鉴定、基因型微生物鉴定。有必要还可进行微生物多相鉴定和微生物溯源分析。表型鉴定主要为通过肉眼观察细胞形态，菌落结构等来判断。还可以通过生物标记物——脂肪酸或蛋白质来鉴定。MALDI-TOF/MS是最近发展起来的用于微生物快速区分和鉴定的一项技术。主要有速度快，操作简单，结果不收培养基影响，不收细菌状态影响，重复性好，稳定性好，高通量，成本低等特点。还有基因杂交等技术也用于微生物表型鉴定中。姚粟最后还介绍了微生物多相分类鉴定技术和溯源分析技术。
