【求助】请教DMSO!

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【求助】请教DMSO!

我用DMSO溶解中药后,再稀释结果药全析出来了。我是1ml的DMSO溶解后,加9ml的生理盐水,本想以此作为母液,做的时候再培养液稀释到所需浓度。谁知全析出来了,浪费了好多。
我想问一下各位大虾是怎么做的?出现过这种情况吗?         我想真的干预的时候,培养液与DMSO的体积比远大于9:1,也就是说DMSO的浓度更稀,岂不是析的更多?
还有DMSO不能直接往细胞里加,会放热,那该怎么办呢?

问题太多,谢谢大家帮忙!!!
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最新回复

  • ladyhuahua (2012-11-10 12:48:49)

    我想真的干预的时候,培养液与DMSO的体积比远大于9:1,也就是说DMSO的浓度更稀,岂不是析的更多?

    ————————————————————————————————————————————————————————————————

    但是,你也别忘了这时候,药物的浓度也被稀释了很多哦。
    如果,配不了太高浓度的母液,那么,你只有把母液浓度调低一些,一般原则上,是使培养液中终浓度的DMSO不超过0.1%,当然也有人说0.5%的,可以参考这个帖子。显然你的母液浓度配得实在太高了。我们一般都加几百微升的DMSO,逐渐加上去的。另外,最后加药的时候,你可以用培养基来稀释药物。
    DMSO直接往细胞里加会放热吗?这个我还真不知道呢?不过,应该是不会的吧,否则冻存细胞采用10-20%的DMSO浓度,那不是把细胞全烧死了吗?呵呵!
    http://www.dxy.cn/bbs/post/view? ... ds=DMSO%C5%A8%B6%C8
  • qqq111 (2012-11-10 12:49:43)

    DMSO加到培养基中是会放热的!冻存的时候应该要先将含DMSO的冻存液预冷至4度,这时候DMSO对细胞的毒性也是最小的
  • qqq111 (2012-11-10 12:49:59)


    我们一般用DMSO配置200*的原液,终浓度0.5%,加药的时候,平皿倾斜,在叶面最高处加药,这样距离细胞会远也,加入后立即混匀,避免局部浓度过高。有时候,有一些沉淀关系不大。
  • DNA (2012-11-10 12:51:01)

    沉淀析出,也就是药析出来了,怎么会没影响呢?怎么才能保证没沉淀呢?是不是DMSO的终浓度越低越好?
  • mysmdbl (2012-11-10 12:51:31)


    DMSO跟水是互溶的,一般药物溶解在DMSO中以后,再用水溶剂稀释的话,应该不会析出的。你的药物析出会不会还有其他的问题。
    另外,我做实验的时候也曾经遇到DMSO加到完全培养基里时溶液温度上升,可能真的存在放热的问题。
  • lgm (2012-11-10 12:51:55)

    你为什么要用生理盐水稀释药物呢,细胞培养中有用审理盐水的吗?
  • lgm (2012-11-10 12:52:28)


    另外是否能溶解主要是物理和化学的问题,先要知道你的药物主要的物理化学性质,蛋白质类与盐溶液混合可能析出沉淀(盐析),盐水中含钠氯,你的药物中含有的离子成分是否有关系,不会含银吧
  • 小糖块 (2012-11-10 12:52:57)


    DMSO加入细胞确实会放热,我曾经用DMSO稀释药物以后静脉腹腔注射大鼠,结果大鼠一会就死掉了,可惜呀。

    至于析出,药物是不是能够在DMSO中完全与药物本身的特性有关,我认为要逐渐加入DMSO,当药物完全溶解后停止。试验时用培养基稀释,由于DMSO与水是可以混溶的,大比例稀释的情况下应该没有析出。

    我的实验就是这样。
  • eric930 (2012-11-10 12:53:26)

    看看我说的对不?
    第一:用DMSO来降低储存液的浓度肯定不行,储存液一般必须高浓度,否则影响药物保存期。而且,DMSO浓度高了对实验也是有不良影响的。
    第二:药物要求用DMSO溶解,说明在水中溶解度差一些。要把含有药物的DMSO1ml一下加入9ml水里,药物必然析出。应该这样,取水0.5ml放入一个离心管,然后向其内加含有药物的DMSO1ml,并吹打,至无沉淀,再向其内加水8.5ml,这样药物就不会析出,别看都是一样的量,加的方法不一样,效果大不相同啊。
    虽然是细节问题,对实验却是很重要的。
    这是我百试不爽的方法,对于有类似问题的战友会有帮助吧?呵呵。因此斗胆要求斑竹给加分鼓励,呵呵。
  • jrwyyplt (2012-11-10 12:53:59)

    我觉得你这个方法是即用即配型的,时间久了还是会析出的。所以用作为母液,应该全用DMSO,保存时间长,又不会析出
  • whitesheep (2012-11-10 12:55:47)

    母液当然是全用DMSO了,我没说明白吧?那位朋友不是说他不会储存,而是临用的时候药物自DMSO中析出,我教的就是怎么不让药物析出啊。
  • 04906 (2012-11-10 12:56:08)


    我也碰见过这种情况,我想这是你的药物的水溶性低造成的。
    而且,我更惨,因为我的药物只能用20%以下的DMSO溶,不然我的病毒就不保了!
    大灵通,不知你的那个方法灵不灵?
  • orangecake (2012-11-10 12:56:33)


    我说一上,一般我们是将药物配成100mg/ml的DMSO母液,用时10ml培养液中加入10微升或更少的量,能溶解的药可迅速溶解,但也有很多药加入后马上析出沉淀,只好于超声波清洗器中超声几分钟,能溶解的也就溶了,不能溶的只能混悬起来.
    可能还有更好的办法,但要靠做药物制剂的同志们来解决,比较麻烦,另外所加助溶剂也可能对细胞有影响.
    我发现用SIGMA的DMSO终浓度达0.05%时对10多种细胞均未发现明显影响,但国产的DMSO好象不太好.
  • 04906 (2012-11-10 12:56:59)

    我的意思是,从我做的一些常规的细胞试验看,对于贴壁细胞,少量的沉淀,细胞毒性试验等试验的结果并不受太大影响,没有太大偏差。
  • mimili_901 (2012-11-10 12:57:17)


    请问大家DMSO配的药物怎么保存?我放在4度冰箱里,结果都结冰了。这样对药效有影响吗?
  • kuaizige (2012-11-10 12:57:52)

    药物一般都是放在室温保存的,放在4度冰箱中温度降低肯定溶解度也会降低的,所以就可能析出!而且和容易结冰了,结冰的话说明你用DMSO配药时是否加别的液体了,单纯DMSO应该不会结冰的!
    你以后放在室温保存就可以了!
  • bling (2012-11-10 12:58:23)


    不知道你溶解什么中药成分呢?我用DMSO溶解过银杏叶提取物GBE,也曾经遇到过类似的情况并且DMSO的浓度为0.1%(这样才不会对细胞产生影响),起初用纯的DMSO能够全溶解,但稀释后就析出,后来我找到了一个好办法使GBE完全溶解了,很简单:高压加热15磅,20分钟.然后就溶解了,4度冰箱中不析出.通过后来的实验证明这种方法促溶后对细胞没有影响,GBE能够起到保护神经元的作用.你不妨试一试啊!
  • xueyouzhang (2012-11-10 12:58:51)


    因为DMSO是水溶,当然要产热了,所以你使用时要预冷
  • yychen (2012-11-10 12:59:14)

    预冷后的DMSO溶解药物会更容易析出,我看如果使用浓度不高,不如直接用DMSO配制,使用时直接加入稀释液中即可,千万不要放置在4度
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