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维生素D的测定——三氯化锑比色法计算（一）
关键词：国家一级标准物质 食品成分检测 环保标准物质 标准品进口维生素D的测定——三氯化锑比色法计算（一）
1．原理
在三氧甲烷中，维生素D与三氯化锑生成橙黄色化合物，并在500 nm波长处有最大吸收，呈色强度与维生素D的含量成正比。
2．仪器
①分光光度计。
②层析柱：内径22 mm，具活塞，砂芯板。
3．试剂
①氯仿、乙醚、乙醇，同三氧化锑比色法测定维生素A。
②三氯化锑一氯仿溶液：取一定量的重结晶三氧化锑，加入其质量5倍体积的氯仿，振摇。
③三氧化锑一氯仿一乙酰氯溶液：取上述三氯化锑一氯仿溶液，加入其体积3％的乙酰氯，摇匀。
④石油醚；沸程30~60℃，重蒸馏。
⑤维生素D标准溶液：称取0．2500 g维生素D。，用氯仿稀释至100 mL，此溶液浓度为mol·L -12．5 mg·mL -1。临用时，用氯仿配制成0．025~2．5µg·m L的标准使用液。
⑥聚乙二醇(PEG)600。
⑦白色硅藻土：Celite545(柱层析载体)。
⑧无水硫酸钠。
⑨0．5mol·L -1氧氧化钾溶液。
⑩中性氧化铝：层析用，100~200目。在550℃高温电炉中活化5．5h，降温至300℃左右装瓶。冷却后，每100g氧化铝中加入水4mL，用力振摇，使无块状，瓶口密封后贮存于干燥器内，16h后使用。
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