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移液器的使用和维护

2016.8.30

  工作原理

  移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下,排出部分空气,利用大气压吸入液体,再由活塞推动空气排出液体。使用移液器时,配合弹簧的伸缩性特点来操作,可以很好地控制移液的速度和力度。

  操作步骤

  1. 设定移液体积

  从大体积调节至小体积时,为正常调节方法, 顺时针旋转刻度即可,从小体积调节至大体积时,可先逆时针调至超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,可保证最佳的精确度。

  2. 装配移液器吸头

  将移液器端垂直插入吸头, 左右轻微旋转上紧吸头。特别提示:用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期这样操作,会导致移液器中的零部件因强烈撞击而松散,甚至会导致调节刻度的旋钮卡住。

  3. 吸液和放液

  吸液

  ↓

  吸头尖端垂直浸入液面 3mm 以下

  ↓

  慢吸慢放,控制好弹簧的伸缩速度

  ↓

  放液时吸头尖端靠在容器内壁

  吸液的方法有:

  a. 预润湿吸液

  粘稠液体可以通过吸头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出,吸头内壁会吸附一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打出液体的体积会很精确。

  b. 正向吸液

  正向吸液是指正常的吸液方式,操作时吸液可将按钮按到第一档吸液,释放按钮。放液时先按下第一档,打出大部分液体,再按下第二档,将余液排出。

  c. 反向吸液

  反向吸液是指吸液时将按钮直接按到第二档再释放,这样会多吸入一些液体,打出液体时只要按到第一档即可。多吸入的液体可以补偿吸头内部的表面吸附,反向吸液一般与预润湿吸液方式结合使用,适用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体。

  使用注意

       1.装配吸头时, 移液器插入吸头,左右轻转旋转上紧吸头。勿用移液器反复撞击吸头。

       2. 选用与移液器匹配的,有质量保证的吸头。

  3. 吸液时,移液器垂直吸液, 做到慢吸慢放。

  4. 吸头内含有未打出的液体时,将移液器垂直挂在移液器支架上,切勿移液器平置于桌面,否则吸头内的液体很容易污染移液器内部而可能导致弹簧生锈。

  5. 移液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内,不要用大量程的移液器移取小体积的液体。

  6. 要移取强挥发性的液体,应该在移液结束后立刻拆开移液器,让蒸汽挥发。 建议使用带滤芯的吸头或使用外置活塞式移液器。

  7. 移液之前,要保证移液器、 吸头和液体处于相同温度。 液体温度高于吸头时,移取的液体体积会偏大,液体温度低于吸头时,移取的液体体积会偏小。

  8. 千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。

  9. 移液器长时间不用时将刻度调至最大量程,让弹簧恢复原形,延长移液器的使用寿命。

  PCR 的移液器操作

  1. 吸液时, 吸头要靠容器壁,这样可以防止气泡的产生。 取完液后吸头靠一下容器壁,去掉吸头外面沾的液体。

  2. 放液时, 移液器竖直悬空, 不让吸头碰容器壁,把液体打入容器的正中央, 或让打出来的液滴去碰管壁。

  3. 2 µL 和 10 µL 的移液器, 吸头浸入液面 1 mm。

  技巧

  避免放液时吸头有残液的方法:

  1. 放液时慢放, 按到第一档时停一下,再按下第二档,将余液排出。

  2. 吹打混匀液体后,边抽出移液器边放液。

  3. 吸头出现残液后,先把液体压到吸头尖端,不松按钮,另一只手把吸头拔出,然后松开按钮,再小心把吸头安放在移液器上,里面的液体就很容易打出来了。

  维护

  1. 校准是指在 20℃~25℃环境中,通过重复几次称量蒸馏水的方法来进行。 1 mL 蒸馏水 20℃时重 0.9982 g。

  2. 定期检查移液器的密封状况,一旦发现密封老化或出现漏液,须及时更换密封圈。

  3. 绝大多数移液器,在使用前和使用一段时间后,要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性。

  4. 每年对移液器进行 1-2 次校正(视使用频率而定)。

  吸头

  吸头的规格有很多,常见的有 10 µL( 白)、 200 µL( 黄)和 1000 µL( 蓝)。

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